逯城宇,张尊凯,刘 艳,张小蕾,张毅君,滕利荣,2,*
(1.吉林大学生命科学学院,吉林长春 130012;2.吉林大学珠海学院,广东珠海 519041;3.新加坡国立大学理学院,新加坡肯特岗 118426)
蛹虫草N102多糖提取条件优化及其抗肿瘤活性研究
逯城宇1,张尊凯1,刘 艳1,张小蕾3,张毅君1,滕利荣1,2,*
(1.吉林大学生命科学学院,吉林长春 130012;2.吉林大学珠海学院,广东珠海 519041;3.新加坡国立大学理学院,新加坡肯特岗 118426)
以蛹虫草高产突变株N102的胞内多糖为研究对象。在单因素实验的基础上采用响应面实验对蛹虫草N102多糖的提取工艺条件进行优化。蛹虫草N102的菌丝体干粉经乙醇除杂、水提、反复冻融、除蛋白、乙醇分级沉淀等方法得到三种多糖组分(2、4和6倍醇沉蛹虫草N102多糖),并采用MTT法分别研究了蛹虫草N102各级醇沉多糖对人宫颈癌细胞Hela体外增殖的影响。结果表明,蛹虫草N102的最佳提取工艺为:提取温度83℃,提取时间3.2h,水料比52∶1(mL∶g)。3次验证实验得到的蛹虫草N102多糖提取率的平均值为7.24%,相对误差为1.16%,可见该模型能较好地预测蛹虫草N102多糖的提取工艺。蛹虫草N102的4倍醇沉多糖(4FPS)对Hela细胞具有较强的抑制作用,当作用时间为72h时,抑制率可达到74.98%,IC50仅1.72mg/mL。
蛹虫草,多糖,提取,响应面,抗肿瘤活性
1.1 材料与仪器
蛹虫草N102 由蛹虫草CICC 14013经亚硝基胍诱变得到,由本实验室保存;人宫颈癌细胞Hela 本实验室保存;胎牛血清 杭州四季青生物工程材料有限公司;DMEM培养液 长春博德生物有限公司;MTT、DMSO 生工生物工程(上海)公司;胰蛋白酶、牛血清白蛋白(BAS) 宝泰克生物科技公司;……