侯东军,杨红菊,于 雷,李 颖,王 海,姜艳彬
(中国动物疫病预防控制中心,北京 100125)
环介导恒温扩增法鉴定牛羊肉中的搀杂肉
侯东军,杨红菊,于 雷,李 颖,王 海,姜艳彬*
(中国动物疫病预防控制中心,北京 100125)
建立了一个鉴定牛羊肉中搀杂杂动物肉的环介导恒温扩增检测方法。确定了一套可在牛羊肉中特异并灵敏地检测出搀杂肉成分的引物对,以动物细胞色素b基因组为模板可在恒温63℃恒温特异性扩增出猪等基因片段而无其他扩增片段影响。可检测牛肉中0.01%~2%的猪肉成分。经与PCR方法比对,结果表明,该方法可有效用于实际生鲜肉或加工肉制品样本的鉴定。
环介导恒温扩增,真实性,鉴定
在国内及国际贸易中牛、羊肉中搀杂价格便宜的猪肉,以次充好的欺骗行为屡见不鲜,在清真肉品种掺猪肉以代替牛羊肉更是严重冒犯了广大具有伊斯兰教信仰的消费者,影响民族团结,这些掺假行为极大损害了消费者的利益。20世纪80年代,国外开始对肉的种属鉴定进行研究,采用的方法主要有DNA杂交、免疫扩散和等电点聚焦等。这些方法大都存在着成本高,工作量大,检测对象要求高等缺点[1-2]。目前,针对掺假行为的检测研究主要基于核酸扩增的PCR方法,检测速度快,灵敏和特异性强,但需要PCR仪才能扩增,这就限制了该技术在条件有限的实验室的应用和推广[3-4]。环介导恒温扩增技术是一种相对于PCR技术较新的核酸扩增技术,特异性、灵敏度都较高,同时可进行恒温扩增反应,对设备要求低,有时仅用恒温水浴锅就可以完成检测。……