芹菜素的抗炎作用及其机制

阚伟娟，喻婉莹，于鹏霞，李敏敏，宋吉帅，赵 烽＊

（1.烟台大学 药学院，山东 烟台 264005；2.烟台赛尔斯生物技术有限公司，山东 烟台 264006）

芹菜素，化学结构为5，7，4’-三羟基黄酮（见图1），是芹菜中的主要生物活性成分，有“植物雌激素”之称，广泛存在于多种水果和蔬菜中，车前子、络石藤、藿香等药材中含有大量的芹菜素。研究表明，其具有抗氧化、清除自由基［1］、抗肿瘤、抗炎［2］等作用。鄂裘恺［3］以小鼠为实验对象，灌胃法芹菜素给药。阿司匹林为阳性对照药，以醋酸所致扭体反应为疼痛指标，以二甲苯所致小鼠耳廓肿胀为炎症指标。结果发现：芹菜素高低剂量组均有镇痛作用，芹菜素高剂量组与阿司匹林组相当。各剂量组均有明显的消炎作用，芹菜素高剂量优于阿司匹林。以上结果提示芹菜素具有良好的镇痛消炎临床应用价值。然而，芹菜素药理学作用的研究大多尚处于动物模型阶段，作用机制仍不清楚。本研究利用LPS诱导体外炎症模型，检测芹菜素对LPS诱导巨噬细胞RAW 264.74释放炎症介质TNF-α、IL-6及NO的抑制作用，以及对iNOS、COX-2蛋白表达水平的影响，旨在探讨芹菜素抗炎的分子机制。

图1 芹菜素（Apigenin）结构

1 材料与方法

1.1 材料

芹菜素（HPLC≥98%）由烟台赛尔斯生物技术有限公司提供，以DMSO溶解、-20℃保存，使用前稀释至指定浓度。RPMI 1640、胎牛血清购自Hyclone公司；LPS（Escherichia coli 0111：B4）、MTT购自Sigma公司；青霉素-链霉素双抗溶液、0.25%胰酶消化液、小鼠TNF-αELISA试剂盒、小鼠IL-6ELISA试剂盒、一氧化氮检测试剂盒为烟台赛尔斯生物技术有限公司产品；Colorimetric COX Inhibitor Screening Assay Kit（760111），anti-murine iNOS polyclonal antibody，COX-2 （murine）polyclonal antibody购自 Cayman公司；β-actin antibody购自Santa Cruz Biotechnology，Inc。

1.2 细胞培养及传代

小鼠单核巨噬细胞株RAW 264.7购自中科院上海细胞库（ATCC TIB-71）；……