人受体活性修饰蛋白1基因修饰的骨髓间充质干细胞移植对兔血管成形术后新生内膜的影响*

龙仙萍， 赵然尊， 石 蓓， 许官学

(遵义医学院第一附属医院心血管内科，贵州 遵义 563003)

1000-4718(2012)04-0675-08

2011-11-26

2012-02-21

国家自然科学基金资助项目(No. 30860100)；贵州省国际合作项目(No. 黔科合外G字[2010] 0732)

△通讯作者 Tel：0852-8608406 ;E-mail: shibei2147@163.com

人受体活性修饰蛋白1基因修饰的骨髓间充质干细胞移植对兔血管成形术后新生内膜的影响*

龙仙萍， 赵然尊， 石 蓓△， 许官学

(遵义医学院第一附属医院心血管内科，贵州 遵义 563003)

目的探讨人受体活性修饰蛋白1(hRAMP1)基因修饰的骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对动脉粥样硬化模型兔颈动脉球囊成形术后新生内膜增殖的影响。方法密度梯度离心法加贴壁培养法获得MSCs，并以携带hRAMP1的腺病毒转染MSCs获得hRAMP1基因修饰的MSCs(hRAMP1-MSCs)。建立动脉粥样硬化狭窄并球囊损伤血管成形术的兔模型，随机分为hRAMP1-MSCs组、MSCs组和对照组，模型建立成功后经耳缘静脉分别注射携带pAd2-EGFP-hRAMP1或pAd2-EGFP的MSCs和PBS，于细胞移植后7 d、14 d和28 d分别处死动物取材, 观察MSCs归巢、血管内皮化程度及内膜增生程度，同时检测血清血管内皮生长因子(VEGF)水平和血管局部内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)表达。结果细胞移植后不同时点hRAMP1-MSCs组和MSCs组损伤血管增生内膜均有CD31和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)分布，但以 hRAMP1-MSCs组内皮化程度明显，MSCs组次之，两者与对照组比较均有显著差异(P<0.05)；细胞移植后不同时点hRAMP1-MSCs组和MSCs组内膜增生面积及再狭窄率均低于对照组(P<0.05)，尤以hRAMP1-MSCs组降低明显；细胞移植后不同时点hRAMP1-MSCs组和MSCs组血清VEGF水平和血管eNOS表达较对照组增加(P<0.05)，而 hRAMP1-MSCs组又明显高于MSCs组(P<0.05)；损伤血管新生内膜增殖细胞核抗原(PCNA)阳性表达在hRAMP1-MSCs组最少，对照组最多。结论hRAMP1基因修饰的MSCs能更有效促进损伤内膜快速内皮化，重组hRAMP1腺病毒载体不影响MSCs向内皮细胞分化潜能。基因联合干细胞治疗能更好地促进损伤动脉快速内皮化，降低血管成形术后再狭窄。

受体活性修饰蛋白1; 间充质干细胞; 新生内膜; 再内皮化; 血管成形术

骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)因其具有多项分化潜能，因此在动脉粥样硬化和心肌梗死的基础领域得以广泛研究。MSCs治疗心肌梗死作用在动物实验和小规模临床研究中得到证实，但较少研究关注MSCs对引起心肌梗死的罪犯血管及其它粥样硬化动脉的影响。……