浙江省7个特用玉米品种的SSR 纯度检测

吕学高，楼肖成，朱正梅，赵军华

(浙江省东阳玉米研究所，浙江 东阳 322105)

SSR (simple sequence repeats)标记因具有快速、准确，信息含量高、呈共显性分离、易于分析、重复可靠等优点，被广泛用于玉米指纹图谱构建、品种真实性鉴定以及纯度检验［1-3］。利用SSR指纹技术鉴定区域试验品种的一致性和真实性在普通玉米中已于2002年开展，并出台了相应标准，2006年在鲜食甜、糯玉米上也开展了此项工作［4］。作者以浙江省4个甜玉米和3个糯玉米品种为材料，选用38 对玉米SSR 核心引物分析检测纯度，以期为浙江特用玉米新品种保护和种子生产提供参考，为农业生产、粮食安全和农民利益提供帮助。现将有关结果报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

7个特用玉米品种，4个甜玉米是超甜3号(三交种)、超甜4号、浙甜6号、浙甜8号;3个糯玉米分别是浙糯玉1号 (三交种)、浙糯玉3号、浙糯玉4号。38 对引物参照北京农林科学院玉米研究中心核心引物筛选［2，5］(表1)，由上海生工生物工程(上海)有限公司合成。SSR 标记在浙江省农科院作物与核技术应用研究所分子育种中心检测。

1.2 方法

玉米基因组DNA 提取。随机选取超甜3号和浙糯玉1号玉米种子15粒，其余品种10粒，将玉米种子置于20 (夜12 h)～26℃ (昼12 h)培养箱培养至2 叶1 心，取第2 叶片放入1.5 mL 离心管研磨，采用CTAB 法提取玉米总DNA。

SSR 检测。PCR 扩增反应体系10 μL，反应体系组成:1 μL 10×Buffer、0.6 μL 25 mmol MgCl2、0.8 μL dNTP (各2.5 mmol)、0.05 μL Taq 酶(5 U·μL-1)、2 μL DNA 模板、2 μL SSR 引物、ddH2O 定容。反应程序:94℃预变性2 min;94℃变性30 s，55～60℃退火40～60 s，72℃延伸1 min，35个循环;72℃延伸5 min［2，5］。

电泳检测:3%琼脂糖凝胶 (0.5× TBE+EB)电泳，10 μL PCR 产物点样，恒压300 V，电泳30～60 min，AlphaImager EP 凝胶成像系统检测。

2 结果与分析

2.1 多态性引物筛选

38 对……