大鼠眼钝挫伤后晶状体上皮细胞的凋亡及Survivin基因对凋亡的影响

2012-11-13 07:53:44刘建伟赵桂秋杜兆东张丽娜张振华
眼科新进展 2012年11期
关键词:检测

刘建伟 赵桂秋 杜兆东 张丽娜 张振华

眼钝挫伤在临床上很常见,钝挫伤可导致多种眼部病变,而外伤性白内障是眼钝挫伤后最常见的并发症之一,它可以引起视功能的严重损伤[1]。外伤性白内障的发病机制目前还未明了。研究表明,晶状体上皮细胞的凋亡是除先天性白内障以外所有类型白内障形成的细胞学基础[2-3]。细胞凋亡是机体维持自身稳定的一种基本生理机制,机体通过细胞凋亡消除损伤、衰老与突变的细胞,当细胞凋亡异常(过高或过低)时,可导致各种疾病的发生。已知与细胞凋亡相关的基因或蛋白有很多,如Caspase家族[4]、c-fos基因[5]、Bcl-2 基因[6]等。Survivin 基因是一种凋亡抑制基因,具有很强的抑制肿瘤细胞凋亡的作用[7-8]。Survivin基因是否会对钝挫伤引起的细胞凋亡有影响呢?本文通过建立大鼠眼钝挫伤模型,研究钝挫伤后晶状体细胞凋亡和Survivin基因表达的特点,并找到两者之间的关联,为更好地认识外伤性白内障的发病机制提供帮助。

1 材料与方法

1.1 材料 (1)实验动物:健康成年Wistar大鼠45只(青岛市动物中心提供),体质量200~250 g,雌雄兼有,实验前行裂隙灯显微镜检查无眼前节病变。所有动物的饲养及处死均按照美国国立卫生研究院(NIH)的《实验动物管理及使用指南》进行。(2)主要试剂及仪器:MK1020细胞凋亡检测试剂盒(武汉博士德工程有限公司),DAB显色试剂盒(武汉博士德工程有限公司),TRIZOL(Invitrigen life technologies公司),RNA PCR KitVer.3.0(TaKaRa 公司),TaqDNA聚合酶(TaKaRa公司)。

1.2 方法

1.2.1 动物模型的制备及分组 45只成年Wistar大鼠,随机选取5只作为正常对……

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