GC-FID测定黄酒中17种游离氨基酸*

李国辉，钟其顶，高红波，熊正河，肖冬光

1(天津科技大学生物工程学院，天津，300457)2(中国食品发酵工业研究院，北京，100027)

黄酒营养最丰富，富含各类氨基酸，其氨基酸主要来自原料及微生物的代谢作用，氨基酸种类及含量高低是评价黄酒风味和营养质量的一项重要指标［1］。

氨基酸的检测方法有显色法［2］、氨基酸自动分析仪法［3］、高效液相色谱法［4］和毛细管电泳法［5］。目前，采用气相色谱分离检测氨基酸的方法在国际上已有报道［6－8，10－12］，在稳定同位素标记的黄酒氨基酸代谢流分析中，由于同位素质谱仪与液相色谱联机局限性，基于液相分离的黄酒氨基酸无法注入稳定同位素质谱仪测定。因此，开发一种基于气相色谱分离检测氨基酸的方法具有重要现实意义。

采用气相色谱分离的氨基酸检测方法需将氨基酸转化为非极性易挥发的衍生物，衍生方法主要包括:硅烷化、酯化和酰化等。其中硅烷化反应具有一步加热反应完成，反应条件相对温和、快速，操作简便，衍生样品可直接进行仪器分析等优点。目前用于甲基硅烷化反应的衍生试剂主要有N，O-双三甲硅烷基乙酰胺(BSA)、N-甲基-N-三甲基硅烷基三氟乙酰胺(MSTFA)、N，O-双(三甲基硅烷基)三氟乙酰胺(BSTFA)及N-(特丁基二甲基硅烷基)-N-甲基三氯乙酰胺(MTBSTFA)反应形成叔丁基二甲基氯硅烷(TBS)衍生物［13］。而MTBSTFA在分析化合物特征离子及稳定性方面更优于BSTFA［14］。衍生原理如下:在氨基酸的氨基和羧基端分别连接-TBDMS基团，经高温裂解之后，部分化学键将沿图1所示的虚线处断裂，测定氨基酸特定基团R［15］。……