猪繁殖障碍与呼吸道综合症RT-PCR检测方法的建立及初步应用



猪繁殖障碍与呼吸道综合症RT-PCR检测方法的建立及初步应用

杨斌 （云南省昆明市动物疫病预防控制中心 661000）白卫兵 （云南农业大学动物科学技术学院 云南 昆明）沈学文*（云南省红河州动物疫病预防控制中心 云南 蒙自）

为建立PRRSV的检测方法并实现不同病料检测的实际应用，根据Genbank中PRSSV的高度保守性序列来设计并合成一对引物，扩增片段大小为372bp。通过对组织、血液、精液3种不同病料提取RNA，对RT-PCR中不同反应条件进行试验，确定了PRSSV最佳检测反应体系。

猪繁殖障碍与呼吸道综合征病毒 RT-PCR 建立 应用

猪繁殖障碍与呼吸道综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS)是由猪繁殖障碍与呼吸道综合征病毒(PRRsV)引起的猪的疫病，俗称“蓝耳病”。以母猪发热、厌食与流产、死产、木乃伊胎和产弱仔等繁殖障碍以及仔猪的呼吸道症状和高死亡率为特征。该病从1987年首次在美国发现以来，迅速传播至全世界养猪发达的国家与地区。目前我国将其定为二类传染病，因其造成母猪繁殖障碍、仔猪死亡及免疫机能障碍，给国内养猪业造成巨大经济损失[1]。

快速诊断是有效防制该病的首要前提。常规的病原学和血清学检测方法不仅特异性差、敏感性低、耗时长、操作繁琐，临床上还易与猪瘟、伪狂犬病、细小病毒病和布病等疾病相混淆。为了有效控制该病的发生，建立一种快速、准确、敏感的病原检测方法显得十分必要。PCR技术是模仿体内DNA复制过程的基因体外扩增技术，该技术以其快速、特异、敏感、简便、产量高和易于操作等突出的优点，不仅消除了常规血清学诊断方法的低敏感性，还可以从分子水平直观快速的检测到病毒核酸的存在。……