吕国庆,闫 晶,李 冠,裴大兵,何立锐,李 亮,肖 平
(北京大学深圳医院1.胃肠外科;2.手术室,广东 深圳518036)
结肠癌的常规化疗途径是将抗癌药通过静脉等血液途径注入体内,全身的不良反应较重,而且药物难以进入淋巴系统。若在术前将抗癌药物导入淋巴系统内,杀灭或减低肿瘤细胞的活性,将有助于预防复发和转移。本研究应用载药纳米碳靶向性进入淋巴系统,对小鼠结肠癌转移模型进行淋巴化疗,探讨其对肿瘤细胞凋亡的影响。
1.1 小鼠结肠癌淋巴结转移模型的建立
将小鼠结肠低分化腺癌Colon 26细胞株(南方医科大学钟田雨博士提供),经细胞复苏、换液、传代等操作,制成2.5×106/ml的单细胞悬液,取雄性清洁级Balb/C小鼠(购于广东省医学实验动物中心),4-6周龄,体重18-20g,SPF(Specefic pathogen free无特定病原体级实验动物)级条件下分笼饲养。在每只小鼠左侧后肢爪垫无菌消毒后皮下接种0.04 ml(约1.0×105个)细胞悬液,接种10-12天后注射处有肿瘤开始生长,爪垫成瘤25-30天后腘窝淋巴结内有肿瘤细胞转移。
1.2 药物制备、实验分组及给药方案
药物配制:①纳米炭作为载体吸附氟尿嘧啶:1 ml纳米炭(CNP,又名卡纳林,lmlCNP含纳米炭50 mg,重庆莱美药业有限公司生产)与3ml氟尿嘧啶(5-Fu)注射液(1ml 5-FU 溶液含5-FU 25mg,上海旭东海普药业有限公司生产)混合,用振荡器振荡15分钟,制成混合液备用。②纳米炭作为载体吸附奥沙利铂:1ml纳米炭混悬液与取奥沙利铂注射液3ml(1ml注射液含奥沙利铂2mg,深圳海王药业有限公司生产)混合,用振荡器振荡15分钟,制成混合液备用。……