p38MAPK介导的Fas/FasL凋亡信号通路在大鼠抗GBM肾炎中的作用①

王晓天 李向阳 秦苏萍 李小翠 尤红娟 汤仁仙

(徐州医学院病原生物学与免疫学教研室，徐州221002)

大鼠抗肾小球基底膜(GBM)肾炎是利用异体抗大鼠GBM抗体诱导后产生的具有典型的人类新月体性肾炎病理变化的动物模型[1]。此肾炎模型病程的早、中期，肾小球内大量的T细胞、巨噬细胞浸润，肾小球内皮细胞明显增多;病程晚期，肾小球细胞明显减少、纤维化、硬化，最终丧失正常肾功能[1-3]。研究发现，肾小球内细胞数减少与细胞凋亡密切相关[4]。

大量研究表明，丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)家族成员p38MAPK在人类新月体性肾小球肾炎发病过程中起到了很重要的作用。目前，研究的热点主要集中在参与炎症反应方面，而对于其是否参与了肾小球细胞凋亡研究很少。p38MAPK调控细胞凋亡的机制非常复杂[5-9]，其中p38 MAPK可通过增强Fas/FasL表达促进细胞的凋亡[7]。为此，本实验利用大鼠抗GBM肾炎模型，运用工具药p38MAPK特异性阻断剂SB203580处理该模型，通过观察肾组织中 p-p38MAPK、p38MAPK、FasL、Fas、Caspase-3蛋白表达，肾小球细胞凋亡以及肾组织病理学变化的情况，探讨p38MAPK介导的Fas/FasL通路在大鼠抗GBM肾炎发病机制中发挥重要作用，为临床防治人类新月体性肾炎提供实验理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物 正常健康SD大鼠25只，体重180～220克，由徐州医学院实验动物中心提供。

1.1.2 主要试剂 兔抗大鼠GBM血清(本实验室制备并保存);尿蛋白定量测试盒、血肌酐测试盒及血尿素氮测试盒(南京建成生物工程研究所);兔抗大鼠p-p38MAPK多克隆抗体(Santa Cruz公司);羊抗大鼠p38MAPK多克隆抗体……