骨髓瘤细胞裂解物致敏的DC-CIK细胞抗骨髓瘤细胞作用①

罗 云 白凤霞 张 萍 娄世锋 (重庆医科大学附属第二医院血液科，重庆400010)

多发性骨髓瘤(Multiple Myeloma，MM)是浆细胞的恶性肿瘤，好发于老年人，占血液肿瘤的第二位。随着多发性骨髓瘤治疗新药的出现及干细胞移植技术的进步，多发性骨髓瘤治疗缓解率较前大为提高，生存时间明显延长[1];但复发、难治仍是临床面临的巨大难题。寻找新的治疗手段或联合治疗方案仍然具有紧迫性，过继细胞免疫治疗毒副反应轻，适应人群广，通过直接向肿瘤患者输注具有抗肿瘤活性的免疫活性细胞，使其在体内发挥抗肿瘤作用。CIK细胞单独或与DC细胞联合已广泛用于实体肿瘤和白血病，但鲜见用于骨髓瘤。我们自2011年7月～2011年12月体外培养负载骨髓瘤裂解物的健康供者DC联合CIK细胞，观察其对骨髓瘤U266细胞株的杀伤作用，以期进一步应用于临床。

1 材料与方法

1.1 材料 U266细胞株购自中国医学科学院肿瘤医院细胞库，RPMI1640培养基购自 Gibco公司，IFN-γ购自上海凯茂生物公司，IL-2购自北京双鹭药业、IL-4、rhGM-CSF厦门特宝生物公司馈赠，淋巴细胞分离液购自天津灏洋生物制品公司，TNF-α购自Protech公司，蛋白定量试剂盒购自南京凯基生物公司，NP40购自Abbott公司;荧光素FITC标记的鼠抗人CD3、CD1a及CD83，藻红蛋白PE标记的鼠抗人CD8和CD56及CD86和CD80单克隆抗体购自BD公司;CO2培养箱(上海力申科学仪器公司)，倒置显微镜(重庆光学仪器厂)，全自动生化仪(日本日立公司)，离心机(湖南平凡仪器厂)，流式细胞仪(美国BD公司)。

1.2 骨髓瘤U266细胞抗原制备 U266细胞在含10%胎牛血清的RPMI1640培养液中……