蓝萼甲素对宫颈癌HeLa细胞的作用及其相关机制研究

黄敬敬，王修珍，蒋小岗，顾振纶，郭次仪

(1.苏州中药研究所，2.苏州大学医学部病理学与病理生理学系，江苏 苏 州 215123)

蓝萼甲素(glaucocalyxin A)是从唇形科香茶菜属植物香茶菜Rabdosia amethystoieds(Benth)Ham中分离提取出的二萜化合物［1］。研究证明:蓝萼甲素具有抗肿瘤、抗菌、诱导细胞凋亡、抗氧化、DNA损伤保护以及细胞毒作用等多种生物活性［2］。蓝萼甲素可抑制多种肿瘤细胞的增殖，如肝癌HepG2细胞株、卵巢癌HO8910细胞株、口腔鳞状细胞癌Tb细胞株、白血病HL-60细胞株等［3］。然而，大量的文献是关于蓝萼甲素的体外细胞毒性，鲜见蓝萼甲素抑制肿瘤细胞增殖的机制，如DNA损伤或引起凋亡的信号通路等文献报道。本文选用的HeLa细胞为人宫颈癌细胞株，观察蓝萼甲素对宫颈癌HeLa细胞株是否具有抑制细胞增殖的作用，初步探讨其机制。

1 材料

1.1 药物 蓝萼甲素(glaucocalyxin A，GLA)，购自上海艾汇生物科技有限公司(纯度≥99%;批号:20100513)。溶于含有20%DMSO的三蒸水中，储存液浓度50 mmol·L－1，－20℃保存备用。

1.2 仪器 CO2培养箱，Napco 5410型，美国Napco公司。生物洁净工作台，YJ-1450 B型，吴江市设备净化总厂。倒置显微镜，CKX41，日本OLYMPUS公司。酶联免疫检测仪，DG5032型，南京华东电子集团医疗装备有限公司。流式细胞仪，EPICS XL型，美国Beckman-Coulter公司。Western blot Power-PacTMBasic，041BR76078，美国 BIO-RAD 公司。

2 方法

2.1 细胞株与细胞培养 人宫颈癌HeLa细胞株购自中国科学院上海细胞生物学研究所。HeLa细胞培养于DMEM培养基(含体积分数为10%的胎牛血清)中，置于37℃，含5%CO2的培养箱中培养，每1～2天传代1次。选取对数生长期细胞进行试验。

2.2 MTT法检测蓝萼甲素对HeLa细胞增殖的抑制作用 取对数生长期的HeLa细胞，用0.25%胰蛋白酶消化成单细……