王瑞芳 秦书俭 程应斌 任占川
(山西医科大学汾阳学院基础部解剖教研室 山西汾阳 032200;①辽宁医学院;②山西省孝义市人民医院麻醉科)
骨折愈合是受多种因素影响的复杂过程,良好的血供对骨折的愈合是非常必要的。缺乏良好的血供将导致骨折延迟愈合和不愈合,因此,解决成骨区血管化的问题已经成为当前研究的热点和难点。本实验旨在探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对骨基质明胶(BMG)包埋血管束的促血管化作用,为解决组织工程骨的血管化问题奠定基础。
1.1 实验动物 健康5月龄日本大耳白40只,体质量1.5~2.0kg,雌雄不限。
1.2 BMG的制备 将4只日本大耳白兔10%水合氯醛腹腔麻醉过量致死后取四肢骨、髂骨,大量蒸馏水清洗后,参照Urist[1]的方法将四肢骨的骺端和髂骨制备成6mm×4mm×3mm的BMG。
1.3 实验动物分组及BMG的植入方法 将36只日本大耳白兔随机分为A、B、C3大组,每大组又分为4、8、12周3个小组。A组:将隐动静脉游离1cm后顺行植入用2μg/mL bFGF处理过的BMG的凹槽内;B组:将隐动静脉游离1cm后顺行植入BMG的凹槽内,BMG不做任何预处理;C组则直接将未处理过的BMG植入,不必分离隐动静脉。最后将移植区逐层缝合。术后5d每天用4万U庆大霉素肌内注射预防感染。
1.4 墨汁灌注及取材 分别于手术后4、8、12周取各组动物,10%水合氯醛腹腔麻醉后,游离腹主动脉、下腔静脉,在腹主动脉离心插管。在下腔静脉做一切口,放血同时往动脉内注入大量肝素生理盐水,直至静脉远端流出无色液体。然后从腹主动脉注入配好的复合墨汁(墨汁、甲醛及生理盐水体积比为3:1:6),远端皮肤、趾甲均已变黑时结扎下腔静脉两端开口,继续灌入少量复合墨汁,结扎动脉保持血管内压力。……