林 璋 洪华山 林军华 林晓红 方美琴
石蜡切片行免疫荧光染色后再行PAS或HE染色确定NPR-A蛋白在肾脏的定位
林 璋1,2洪华山1*林军华1林晓红1方美琴1
(1福建医科大学附属协和医院,福州,350003;2福建省老年医院心血管内科,福州,350001)
目的 介绍一种新方法来明确NPR-A蛋白在大鼠肾组织的定位。方法 采用肾脏石蜡切片先行NPR-A免疫荧光染色,然后再行PAS或HE染色。结果 NPR-A免疫阳性物在大鼠肾组织主要沉积于皮质的近端小管、外髓的髓袢升支粗段以及内髓集合管,直小血管、肾小球、远曲小管和细段也有一定量的表达,而皮质及外髓集合管仅有少量的表达。结论研究采用石蜡切片先行免疫荧光染色后再行PAS或HE染色,在不用或少用特异性抗体的情况下,成功的解决了NPR-A蛋白在大鼠肾组织表达的分布位置及细胞定位的难题。
A型利钠肽受体;免疫荧光染色;肾脏;定位
组织蛋白的定位研究对于阐明其功能具有十分重要的意义,尤其对于科研工作者,常常需要对组织蛋白进行准确的定位。肾脏作为体内组织结构较为复杂的器官之一,单纯依靠免疫组织化学染色方法(包括免疫荧光法)来辨认某些蛋白(抗原)在肾组织的分布位置以及细胞定位十分困难。A型利钠肽受体 A(natriuretic peptide receptor-A,NPR-A),被认为在肾脏具有广泛的分布,然而对其在肾组织的分布位置及细胞定位,目前仍未完全阐明[1,2]。本研究介绍一种新方法,即采用石蜡切片先行免疫荧光染色,然后再行过碘酸雪夫-糖原染色(PAS染色)或苏木素-伊红染色(HE染色),明确NPR-A蛋白在大鼠肾脏的组织分布及细胞定位,旨在为科研工作者提供一种简单而有效地研究某些蛋白在肾组织内定位的新方法。……