紫藤根茎叶化学成分预实验

宋 晓 姜国良 赵雪梅

(泰山医学院药学院，山东 泰安 271016)

紫藤(Wisteriasinensis(Sims)sweet)属豆科紫藤属，喜缠绕上升，花序总状下垂，花期4、5月，花蓝紫色，先叶开放，穗大而美，具芳香，花粉为扁球形，观赏价值高，广泛应用于园林、庭院绿化及盆景用材[1]。该物种为有毒植物，其豆荚、种子和茎皮有毒。紫藤花精油的主要成分是龙涎香精内酷、里哪醇、α-淞油醇等，提炼芳香油，并有解毒、止吐泻等功效[2-3]，紫藤花对香瓜枯萎病菌和白菜软腐病菌具有良好抑制作用[4]。紫藤的种子有小毒，含有氰化物，可治筋骨疼。紫藤皮具有杀虫、止痛、祛风通络等功效，可治筋骨疼、风痹痛、蛲虫病等[5-6]。据文献[5-6]报道紫藤瘤具有治疗胃癌的作用，民间也有利用紫藤茎瘤配伍适量惹仁、野菱、诃子子治疗胃癌。但目前为止对紫藤治疗胃癌的活性成分研究尚未见到有文献报道。本研究旨在通过对紫藤的根茎叶三个部位的化学成分进行定性分析，有望在抗癌领域有一定的应用前景，开辟治疗胃癌的新领域。

1 仪器与试剂

1.1仪器

电子天平，电热恒温水浴锅(北京市长风仪器仪表公司)、DESAGA型双波长扫描仪CD60(上海康华生化仪器制造厂)、旋转蒸发器RE-52A(上海亚荣生化仪器厂)、SHB-III循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司)、硅胶板(青岛市红星硅胶试剂厂)、玻璃棒、50 ml容量瓶、500 ml圆底烧瓶、100 ml量筒、烧杯、25 ml锥形瓶、三角瓶。

1.2材料

紫藤的根、茎、叶分别采于2011年6月10日泰山医学院校区。

1.3试剂

pH试纸、滤纸、称量纸，95%乙醇、60%乙醇、乙酸乙酯、正丁醇、氯仿、石油醚、甲醇、醋酸，茚三酮、三氯化铁、硅钨酸、碘-碘化钾、碘化秘钾、硫酸香草醛、盐酸、镁粉、α-萘酚、枸橼酸、2%二氯氧化锆、25%二氯乙酸乙酯。

2 方法与结果

2.1化学成分预实验

2.1.1提取液的制备

石油醚提取：取紫藤根、茎、叶各5 g，加入50 ml石油醚，加热回流3 h，过滤。滤液待进行预实验。

醇提取：取紫藤根、茎、叶各5 g，加入95%乙醇50 ml，加热回流2 h，过滤。滤液待进行预实验。

水提取：取紫藤的根、茎、叶各5 g，加入蒸馏水50 ml，80℃水浴加热回流2 h，过滤。滤液待进行预实验。

2.1.2化学成分的预试

将上述所得滤液进行化学成分的预试，用碘化铋钾、碘-碘化钾、硅钨酸试剂检查生物碱成分，用盐酸-镁粉反应、ZrOCl2-枸橼酸反应检查黄酮类化合物，用泡沫实验、氯仿-浓硫酸反应检查皂苷成分，用茚三酮试剂检查蛋白质、氨基酸，用三氯化铁试剂检查酚性成分，用Molish反应检查糖及苷类化合物，用碱性反应检查蒽醌类成分，用酸性苦味酸试剂检查强心苷，用硫酸香草醛试剂检查甾体萜类成分，用油脂实验检查挥发油、油脂成分，用pH试纸检查有机酸成分。

2.2薄层色谱预试法

2.2.1化学成分系统提取法

紫藤根、茎、叶各25 g，分别置于500 ml圆底烧瓶中，加入60%乙醇100 ml加热回流1 h，过滤，滤液待用，滤渣再加入60%乙醇100 ml加热回流1 h，过滤，合并滤液；滤渣加入95%乙醇75 ml加热回流1 h，过滤，合并滤液；滤渣再加入95%乙醇75 ml加热回流1 h，过滤，合并滤液待用，滤渣弃掉。

将上述滤液分次用旋转蒸发仪35～40℃，减压浓缩，浓缩至无醇味。 然后将浓缩浸膏置于分液漏斗中按1∶1分别加入石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取，各萃取两次，分别合并石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取液，每种萃取液依次转移至各三角瓶中待用。

2.2.2薄层色谱分析

分别用毛细管吸取紫藤根、茎、叶的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取液适量，点到硅胶薄层板的起始线上，使用适当的展开剂展开，当展开至距薄层板上边缘1 cm处时，将板取出做好标记，挥干展开剂，及时用铅笔将斑点标出，记录Rf。将上述根茎叶四种萃取液的硅胶薄层色谱板在以氘灯为光源，200～600 nm下进行紫外薄层色谱-双波长薄层扫描。

2.3实验结果

2.3.1化学成分预实验结果 通过进行生物碱，氨基酸、多肽和蛋白质，有机酸，酚性成分，糖及苷类，皂苷，黄酮体，挥发油及油脂类，蒽醌类检查，得出如下结果，见表1。

表1 紫藤根茎叶化学成分预实验结果

续表

注：(1)A:水提取液；B:醇提取液；C:石油醚提取液；(2)“+++”表明反应很显著；“++”表明反应较显著；“+”表明有反应现象；“-”表明无反应现象或很弱。

2.3.2薄层扫描结果 通过薄层色谱扫描，得到扫描图谱的分析结果见表2～4。

表2 紫藤根的薄层扫描分析结果

表3 紫藤茎的薄层扫描结果

表4 紫藤叶的薄层扫描结果

3 讨 论

由表1结果分析可以推断：①紫藤根茎叶中可能含有生物碱、黄酮类、蛋白质、酚性成分、蒽醌类、甾体萜类及有机酸成分；其中根和茎中还含有皂苷、糖及苷类成分，茎中含有强心苷类成分；通过油脂实验，根茎叶三部分均未检测出挥发油及油脂。②水提液中和醇提液中检测出的化学成分类型较石油醚提取液中多。③水提液中含有的皂苷、蛋白质和糖及苷类成分较醇提液和石油醚提液中多，醇提液中所含有的生物碱、黄酮类成分及蒽醌类较水提液和石油醚提液中多。④对石油醚提液所进行的化学成分检测，三氯化铁试验有反应现象，为阳性结果，其他反应均为阴性结果，说明石油醚提液中可能含有少量的酚性成分。

由表2紫藤根氯仿的萃取液第一个点扫描结果，最大吸收波长在320 nm和265 nm，由此推测，可能是黄酮类化合物的特征吸收，说明根中可能存在黄酮类化合物；由表2紫藤根正丁醇提取液第二点的扫描结果，最大吸收波长在240 nm和270 nm有吸收峰，蛋白质分子中的酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸在280 nm处左右有较强的吸收，肽键在238 nm处左右有较强吸收，由此推断根中可能含有蛋白质类物质；由表3紫藤茎氯仿萃取液第二点的扫描结果，最大吸收波长在240 nm和280 nm，因为苯醌类在240 nm左右有强吸收峰，在285 nm左右有中强吸收峰，由此可推断可能是苯醌类化合物；由表4中叶-石油醚萃取液三个点紫外薄层扫描在420 nm和440 nm左右有特征吸收，推断这些可能是色素类物质。

综上所述，紫藤根茎叶中可能含有生物碱、黄酮类、蛋白质、酚性成分、蒽醌类、甾体萜类及有机酸等化学成分。本文首次对紫藤根茎叶进行了化学成分预实验，初步确定了其可能含有的化学成分，为进一步进行该植物生物活性成分的确定、提取、分离研究提供了研究基础。

[1] 包启伟．福建西北部术本攀援植物观赏与应用[J]．浙江林学院学报，2000，17(2)：225-228．

[2] 李峰，傅佑丽．紫藤花油化学成分的气相色谱∕质谱法分析[J]．曲阜师范大学学报，2008，8(2)：81-83．

[3] 李祖光，雅芳，芮昶．紫藤鲜花香气化学成分的研究[J]．香料香精化妆品，2005，2(1)：1-3．

[4] 姜艳华，樊晓晖，姜华．紫藤活性成分的提取与抑菌作用初探[J]．河南农业科学，2009，3(1)：60-63．

[5] 全国中草药汇编:下册[M].第2版．北京：人民卫生出版社，1975：620．

[6] 周国平．癌症秘方验方偏方大全[M]．北京：中国医药科技出版社，1992：175．