日本柳杉花粉变应原致敏蛋白组分

李文静，刘光辉

(华中科技大学附属同济医院过敏反应科，武汉 430030)

日本柳杉(Cryptomeriajaponica， Japanese cedar)(以下简称柳杉)为多年生常绿乔木，属松柏门松柏纲松柏目柏科落羽杉亚科日本柳杉属，是该属的唯一树种。柳杉广泛分布于我国和日本，欧洲、北美、尼泊尔、印度等国也多有种植。在日本，柳杉覆盖率可达国土面积的18%，每到花粉季节，这些树木所产生的大量花粉长距离播散(播散距离可100 km以上)，导致日本国内超过13%的人口产生过敏，出现全国范围的花粉症[1-2]，且其发病率还有逐年上升的趋势[3]。

柳杉与其他柏科植物一样，花粉中含有大量的多糖成分及色素、苯酚等杂质，浸液蛋白产率仅为4.1‰[2]。其蛋白含量虽然很低，但变应原蛋白成分却很复杂，除了公认的2种主要变应原蛋白组分Cry j 1和Cry j 2外[4]，还含有其他多种可与柳杉花粉症患者血IgE结合的成分。目前，通过二维电泳及免疫印记等方法共发现了131种可与IgE结合的蛋白组分，其中IgE结合率高于Cry j 1 IgE结合力最低异构体的有52种，相对分子量为35000～97000，等电点为3～10；高于Cry j 2 IgE反应性最高异构体的有31种，相对分子量为35000～97000，等电点为4～10[5]。随着研究的深入，这些成分已被分离、纯化并鉴别，如Cry j 3，CJP-6，CJP-4，CJP-8及CPA9等。

Cry j 1

Cry j 1是最先被分离鉴别的柳杉花粉变应原蛋白组分，发现初期时被称为Sugi碱性蛋白(sugi basic protein，SBP)。SBP为热敏感蛋白，等电点约为9，100 g干花粉可分离出25 mg SBP[2]。1993年，Cry j 1的cDNA及氨基酸序列被正式发布[6]。重组Cry j 1含有374个氨基酸残基，相对分子量在异构体间略有差异，为41000～46000。分子中推定含有4个糖基化位点和3个双硫键。Cry j 1的部分氨基酸序列(RMPRARYGLVHVANNNY)与细菌果胶裂解酶的一致性较高，可达49%～57%[7]；……