浅议药品杂质分析的方法验证

北京市药品审评中心（100061）陶林 田晓娟 佟利家

药品在临床使用中产生的不良反应除了与药品本身的药理活性有关外，有时与药品中存在的杂质也有很大关系。药品中的杂质是否能得到合理、有效的控制，直接关系到药品的质量可控。为使杂质测试结果准确、可靠，必须对所采用的分析方法的科学性、准确性和可行性进行验证，以充分表明所采用的杂质分析方法能够满足有效分离、检出杂质及对杂质进行准确定量的目的要求。

有关物质分析方法验证是质量研究和质量控制的重要组成部分，申报资料中需要提交完整的方法学验证内容。国家食品药品监督管理局于2005年颁布了《化学药物质量控制方法验证技术指导原则》（简称“指导原则”）[1]，并且在现行版中国药典二部附录中也收载了《药品质量标准分析方法验证指导原则》（简称“指导原则”）[2]，这些指导原则均对分析方法验证的内容作了系统的规范要求。笔者在申报资料初步审查中，发现一些申请人进行杂质研究的具体工作时，由于对杂质控制分析方法验证的目的和要求理解不够准确透彻，没有针对研发品种的具体情况，开展验证工作，简单地按照指导原则中要求的验证内容进行试验，机械地照搬试验方法，以完成指导原则中要求的试验项目为目的，在验证内容的选择、实验操作、数据处理等方面与进行方法验证的目的相去较远。

总体来说，杂质检查方法验证的内容应根据检测目的，结合所采用分析方法的特点确定，可以包括专属性、线性、范围、准确度、精密度、检测限、定量限、耐用性和系统适用性等。一般用于限度试验的方法验证侧重专属性和检测限，用于定量试验的方法验证强调专属性、准确度和定量限。

为了更好地理解杂质分析方法验证目的和要求，本文对杂质分析各项验证内容做一初步解析。

1 专属性

专属性系指在其他成分可能共存的情况下，采用的方法能准确测定出被测杂质的特性。根据杂质的可获得性，可以将杂质分为可以获得的杂质（这类杂质一般指有相应的市售对照品或各步反应的中间体，一般称为已知杂质）和无法获得的杂质（一般多为降解产物或副反应产物，也称未知杂质），对二者检测方法的验证，采用的手段有所不同。

1.1 可获得的杂质（已知杂质） 对于原料，在原料试样中加入定量的已知杂质，证明该杂质与其他共存的物质能得到分离和检出，即该杂质与其他各杂质之间以及该杂质与主成分之间的分离。

对于制剂，在按处方将原料和辅料混合配制的试样中或者制剂产品中加入定量的已知杂质，考察各杂质之间、杂质与辅料之间以及杂质与主成分之间的分离。同时应该进行溶剂空白和辅料空白试验，以确定空白干扰情况。

1.2 不能获得的杂质（未知杂质） 可以将生产工艺中获得的原料粗品试样或者工艺筛选所得制剂产品试样进行分析，考察在无法获得的副产物、中间体、降解物存在情况下各杂质的分离及杂质与主成分的分离情况。必要时，可进行供试品的强制降解试验，即将供试品用强光照射、高温、高湿、酸水解、碱水解以及氧化的方法进行破坏，以考察破坏前后杂质的基本情况。

需要说明的是，申请人进行强制降解试验的时候，应该考察降解条件的适度性。原则上破坏出的杂质水平不宜过高或者过低。同时，应该特别关注质量平衡，所谓质量平衡是将主成分的含量和杂质测定结果相加，考察其与未破坏的原始结果的接近程度。尽管该数据并不适用于所有情况，但对质量平衡的考察在确保含量和杂质测定的专属性、研究降解途径的完整性、测定方法的准确性上均有一定的科学意义。申请人应结合强制降解试验所得的质量平衡结果和影响因素试验、加速试验、长期试验等所得的质量平衡结果，采用综合评价含量测定和杂质控制的分析方法。

（未完待续）