青岛地区猪伪狂犬病血清学调查

张 倩 杨培培 刘明团 （山东省青岛市畜牧兽医研究所 266100）

青岛地区猪伪狂犬病血清学调查

张 倩 杨培培 刘明团 （山东省青岛市畜牧兽医研究所 266100）

应用血清学方法对从青岛4个地区8个规模化猪场和10个养殖户采集血清进行猪伪狂犬病调查。结果表明，有3个规模化猪场7个养殖户出现野毒感染抗体阳性，猪伪狂犬gB-ELISA试剂盒检验阳性率为91.5%，gE-ELISA试剂盒检验抗体阳性率为15.42%，表明猪伪狂犬病在山东地区猪群中流行范围仍然很广。

伪狂犬病(PR)是由伪狂犬病病毒引起家畜和多种野生动物的一种急性、热性传染病。典型症状表现为发热、奇痒及脑脊髓炎。本病对猪的危害最大，可导致妊娠母猪流产、产死胎和木乃伊胎；初生仔猪具有明显的神经症状，急性致死。目前本病在世界范围内普遍发生，已有50 多个国家和地区报道发生PR。随着规模化养猪的不断发展和强毒株的出现，PR 的发生和流行日趋严重，现已成为对全球养猪业危害最大的传染病之一，每年给养猪业造成了巨大的经济损失。为了解近年来青岛地区猪场中PRV的感染情况，本试验采用PRV gE-ELISA、gBELISA抗体检测试剂盒对青岛规模化猪场进行PRV 血清抗体检测，为该病的防控提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 待检血清 2013年1～6月，采集青岛即墨、平度、胶州、莱西等4个地区的8个不同规模猪场和10个养殖户，合计1070份血清。其中仔猪(1～8周龄)血清347份，育肥猪(9周龄以上至出栏)血清291份，后备母猪(9周龄以上～初次配种)血清139份，种公猪血清58份，种母猪血清235份。采集的血清样本置于-20℃保存备用。

1.2 试剂 猪伪狂犬病病毒gE-ELISA、gB-ELISA抗体检测试剂盒，购自美国IDEXX公司。

1.3 方法 按试剂盒操作说明进行：(1）将经2倍稀释后的待检血清加入到预包被抗原的ELISA板内，100μl/孔，同时设立阳性和阴性对照孔。（2）室温孵育1h。（3）加入洗涤液洗涤3次。（4）每孔加入l00μl HRP标记的PRVgE/gB抗体，室温孵育20min。（5）加入洗涤液，重复步骤（3）。（6）每孔加入l00μl TMB底物显色液，室温下避光显色10～15min。（7）每孔加入50μl终止液，使反应终止。（8）酶标仪上测650nm处的OD值，并记录结果。

1.4 结果判定 当阴性对照平均值减去阳性对照平均值大于或等于0.3 时，判为试验成立，否则应重新测定。在试验成立的前提下，若S/N≤0.6，判为阳性血清；若0.6＜S/N≤0.7，判为可疑；若S/N＞0.7，判为阴性血清。

2 结果

2.1 不同地区PRV抗体阳性率 采用ELISA 方法，对采集的8个不同规模猪场和10个养殖户合计1070份血清进行PRV 抗体检测发现，PRV gB抗体阳性血清样品共979份，抗体平均阳性率为91.5%，gE抗体阳性的血清样品共163份，抗体平均阳性率为15.23%。各地区的抗体阳性率差异不大，具体结果见表1。

表1 不同地区猪伪狂犬病抗体检测结果 (%)

2.2 不同日龄PRV抗体阳性率 根据各地区PRV 野毒抗体的检测结果，分析不同日龄猪群与PRV 野毒抗体阳性率高低的关系。结果显示，不同日龄猪PRV 野毒抗体阳性率存在一定的差异：种母猪的抗体阳性率最高，为21.70%；其次是后备母猪、种公猪及育肥猪，阳性率分别为17.98%，15.52%和14.08%；仔猪的PRV野毒抗体阳性率最低，为10.66%。具体结果见表2。

表2 不同日龄猪伪狂犬抗体检测结果 (%)

3 讨论

（1）猪伪狂犬病是当前我国规模化猪场主要的威胁性疫病之一，给我国养猪业造成了严重的经济损失。本次调查采样猪场全部免疫过伪狂犬病毒gE基因缺失苗的。调查显示，养殖户的猪群野毒感染率明显高于规模化猪场，各地区猪场PRV野毒抗体阳性率差异不大，抗体平均阳性率为15.23%。反应了大部分规模化猪场在使用猪伪狂犬病毒gE基因缺失苗后对于猪伪狂犬病毒野毒感染的控制取得了一定的效果。调查还显示，种母猪的抗体阳性率最高，为21.70%，这表明母猪的带毒现象仍然严重，PRV野毒感染仍然是导致母猪繁殖障碍疾病的重要病原之一，应引起各养猪场的重视。建议进一步加强猪场PRV野毒感染的生物安全控制，特别是检测呈阳性的猪场或养殖户，应进行全面的定期监测普查，及时清除PRV野毒感染猪只，使猪群逐步得到净化。（2）通过对猪场gB抗体的检测发现，虽然都免疫过疫苗，但抗体的水平却达不到100%，说明猪场接种了猪伪狂犬病疫苗后，还会有少数猪发生伪狂犬病。其原因可能与疫苗的质量和猪的个体差异有关，也可能与猪群中存在免疫抑制性疾病等因素有关。猪场应通过定期监测适时补免，或使用鉴别ELISA检测进行净化，同时也要加强其他疫病特别是猪瘟、蓝耳病、圆环病等疫病的检测。猪伪狂犬gBELISA检测不能鉴别疫苗毒与野毒感染，因此对未免疫猪场可作为疫病检测和净化的参考。对于免疫过基因缺失疫苗的猪场，gE-ELISA检测则可用于该病的血清学诊断和净化。

S858.28

A

1007-1733(2013)12-0052-02

2013–09–22）