直链烷基苯磺酸钠对小鼠精子成熟和生育能力的影响

窦晓卫，任春娥，柏宏伟，刘洪香，张安清

(潍坊医学院，山东 潍坊 261042)

精子成熟是一个复杂的过程，在睾丸内生成的精子没有良好的活动能力。在从睾丸向附睾的输送过程中逐渐完成形态和功能的转变，因此附睾是促进精子成熟、储存的重要器官［1］。直链烷基苯磺酸钠(linear alkylbenzene sulphonates，LAS)是合成洗涤剂的表面活性物质，其对睾丸结构和生殖能力的影响已有相关报道［2］，而亚慢性或慢性LAS染毒对哺乳动物生殖能力的影响却鲜有报道，尤其是对精子成熟过程及相关作用机制的研究甚少。本实验采用昆明雄系小鼠作为动物模型，观察附睾头和附睾尾精子的功能参数，结合与正常雌鼠交配后所生子代的情况，评价直链烷基苯磺酸钠对小鼠精子成熟和生育能力的影响，为研究LAS 的生殖毒性机制提供相应的参考资料。

1 材料与方法

1.1 主要试剂及仪器 直链烷基苯磺酸钠(LAS，C18，有效含量不低于95%，天津市科密欧化学试剂有限公司)，伊红染液、苏木素染液、二甲苯、中性树胶等，WLJY 精子分析系统，YD－AB 型生物组织摊烤片机，BX41TF 光学显微镜，H－7500透射电镜等。

1.2 实验动物及染毒模型的建立 健康雄性昆明小鼠60 只，鼠龄4 周，体重29～34 g，随机分为实验组A (LAS 630 mg/kg)，实验组B (LAS 315 mg/kg)，对照组C (生理盐水)，每组20 只。实验组小鼠经口摄入直链烷基苯磺酸钠，每日1 次，连续染毒60 天，各组小鼠均常规饲养，光照10 h/d，自由饮食和饮水。雌鼠30 只，6～8 周龄，体重20～25 g，常规饲养1 周，用于与雄鼠的交配。

1.3 小鼠附睾精子参数的检测 染毒60 天时，颈椎脱臼法处死小鼠，每组处死10 只，迅速解剖取附睾头和附睾尾，分别置于1 mL 的生理盐水中(37℃预热)，孵育1 分钟后，常规精液涂片，光学显微镜下至少观察100 个精子，计数精子密度、活力及胞浆小滴率。……