翟永贞 马 力 冯国和 (中国医科大学附属盛京医院感染科,沈阳 110004)
日本脑炎(Japanese encephalitis,JE)DNA疫苗诱导的细胞免疫和体液免疫仍达不到预期效果,一系列措施用来增强JE DNA疫苗的免疫效果[1]。目前越来越多的研究表明,树突状细胞(Dendritic cells,DCs)是DNA疫苗免疫应答的中心环节,质粒DNA可直接转染注射部位抗原提呈细胞,质粒DNA直接转染抗原提呈细胞是诱导特异性CTL应答最有效的途径[2]。因此,如何通过各种途径促进DCs的成熟、增强DCs的功能,最终诱导DNA疫苗产生广泛的细胞免疫和体液免疫应答,是优化DNA疫苗的一种关键策略。
DCs刺激抗原特异的T细胞启动依赖于DCs向T细胞传递的两个信号,除研究最深入的CD28/B7外,细胞间粘附分子-1(Intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)与淋巴细胞功能相关抗原-1(Lymphocyte functional antigen-1,LFA-1)也是一对与 T细胞活化密切相关的协同刺激受体/配体[3]。ICAM-1在基因疫苗方面已有研究报道,有学者研究表明ICAM-1能提供给T细胞共刺激信号,并且证实该刺激信号通路独立于CD86介导的T细胞活化的第二信号通路[4]。
基于上述研究结果,本研究采用肌注方式对BALB/c小鼠进行DNA疫苗免疫,联合ICAM-1编码基因进一步促进APC与T细胞接触区域的相互作用,从免疫鼠脾脏树突状细胞吞噬能力、表面分子表达、刺激T淋巴细胞增殖多层面观察ICAM-1编码基因对脾脏树突状细胞功能的影响,明确ICAM-1编码基因在小鼠脾脏树突状细胞与T细胞相互作用中的意义,为JE DNA疫苗增强效应的深入研究提供实验依据。
1.1 质粒、细胞及主要试剂 含JEV prME蛋白编码基因重组质粒被命名为pJME,由感染科实验室保存。……