蜂胶中总黄酮提取及含量测定的条件研究

王大红 陈明胜

（1.湖北武汉职业技术学院，武汉 430074；2. 湖北武汉名盛生物科技有限公司，武汉 430022）

蜂胶是蜜蜂从植物芽孢或树干上采集的树脂（树胶），混入其上腭腺、蜡腺的分泌物加工而成的一种具有芳香气味的胶状固体物。经过科学证实，蜂胶含有黄酮类化合物、酸、醇、酚、醛、酯、醚类以及萜烯类、甾类化合物和多种氨基酸、脂肪酸、酶类、维生素、多种微量元素等多种活性成分。近代研究证明，蜂胶所含有的丰富而独特的生物活性物质，使其具有抗菌、消炎、止痒、抗氧化、增强免疫、降血糖、降血脂、抗肿瘤等多种功能。黄酮类化合物是蜂胶中的主要活性成分，常用醇提法提取。本实验研究了乙醇浓度、料液比、提取时间、提取温度四个因素对蜂胶总黄酮提取率的影响，然后通过正交试验研究了蜂胶总黄酮提取的最优工艺条件。

1 材料与方法

1.1 实验材料

蜂胶：由武汉名盛生物科技有限公司提供。

1.2 试剂

芦丁对照品（纯度92.5%）、95%乙醇、无水乙醇、10%Al（NO3）3溶液、5%NaNO2溶液、10%NaOH溶液。

1.3 仪器

紫外可见分光光度计、恒温水浴锅、抽滤装置、冷凝回流装置、电子分析天平、100 ml量筒、50 ml容量瓶、100 ml容量瓶、吸量管、烧杯、铁架台。

1.4 实验方法

1.4.1 蜂胶总黄酮的提取工艺

取3.0 g蜂胶粉，加入75%乙醇水溶液90 ml，在50℃水浴下浸泡提取4 h，浸出蜂胶黄酮后，取出静置，冷却后将溶液过滤，滤液备用。

1.4.2 蜂胶提取液中总黄酮含量的测定

准确吸取蜂胶提取液2 ml，稀释至10 ml，再吸取稀释液1 ml，置于50 ml容量瓶中，加5%NaNO2溶液2 ml，放置6 min，然后加入10%Al（NO3）3溶液2 ml，放置6 min，再加入10%NaOH溶液12 ml，用无水乙醇定容至刻度，摇匀，放置15 min，在508 nm波长处测定吸光度。……