柯芳芳,李 蕾
(安徽农业大学 生命科学学院,安徽 合肥 230036)
乳酸菌细菌素不仅种类多、来源广而且生物学特性优良,是目前研究得最深入广泛的细菌素,而这其中乳酸链球菌产生的Nisin是最早深入研究的代表,并依此建立多个研究模型,对其他细菌素的研究也有很大帮助,Nisin已被公认为安全高效的食品防腐剂[1].其他类乳酸菌素的研究也有很多,仅报道的清酒乳杆菌素Sakacin有30多种[2],这些细菌素作为防腐剂均具有高安全性,无毒副作用等特点.目前,研究发现细菌素的生物活性的表现有多种作用机制,一般来说,细菌素在易感细菌细胞膜上形成孔道是最常见的作用机制,目前孔道形成的模型有桶板模型、地毯模型(The Carpet Model)以及环形孔模型(The Toroidal Model)三种[3],准确了解这些作用机制对研究细菌素的毒性和合理应用细菌素具有重要意义.由于Nisin仅能抑制革兰氏阳性细菌而对革兰氏阴性细菌无抑制作用,故而迫切需要寻找新的高效广谱细菌素,Sakacin LSJ618可对革兰氏阳性细菌及阴性细菌都有一定的抑制作用,研究其作用方式有助于更好地将Sakacin LSJ618,甚至其它新型细菌素应用于食品行业.
1.1.1 菌种及培养基
清酒乳杆菌(Lactobacillus sakei)LSJ618,本实验室分离得到,MRS培养基培养;鸡白痢沙门氏菌(Salmonella pullorum)(实验室保存菌株),藤黄微球菌(Micrococcus luteus)(实验室保存菌株),LB培养基培养.
1.1.2 主要试剂及仪器
SephadexTM G-50,紫外分光光度计,电导仪,AvantiTMJ-20XP高速冷冻离心机.
1.2.1 清酒乳杆菌素LSJ618的提纯制备
清酒乳杆菌37℃恒温静置培养24h后,4℃,8000rpm,离心20min,取上清液并经0.22μm滤膜过滤;……