赵 玲,王程程,李敏通,王蓉晖,李延斌,胡耀华,*
(1.西北农林科技大学机械与电子工程学院,陕西杨凌712100;2.美国阿肯色大学生物和农业工程系,阿肯色州费耶特维尔72701)
志贺氏菌属是革兰氏阴性、兼性厌氧、无芽孢、不运动、通常不发酵乳糖的棒状杆菌。志贺氏菌属是引起人类肠道疾病常见的病原菌,在我国感染性腹泻病原菌中高居首位[1]。目前在国内外,直接从食品中制备的样品往往因为含有的目标微生物太少难以检测,所以大多都采用先增菌后检测的方式,这时不仅会耗费大量的时间,而且检测可信性差[2]。利用人工合成的磁性颗粒对目标细菌进行分离、浓缩进而检测的方法在以往已经有了快速的发展[3]。细胞的磁性分离与其他的分离方法相比可以使细胞直接从原始的食品样品里分离并且简单、快速,与电磁场相比,静磁场也不会干扰水溶液中离子和带电溶质的移动。目前已有利用免疫纳米磁珠实现对食源性病原菌如大肠杆菌[4]、沙门氏菌[5]、李斯特菌[6]、阪崎杆菌[7]等肠道致病菌的特异、快速的富集,并结合量子点荧光标记、吸光度检测、ELISA 等方法或是各种PCR 方法实现对单个或多种目标菌的定量检测[8-14]。目前还没有采用该种方法对志贺氏菌进行分离、富集的报道,本研究制备免疫纳米磁珠(immunomagnetic nanobeads,Immuno-MNBs),将针对目标抗原的特异性抗体直接包被于磁珠的表面,从而能够识别目标微生物,利用其超顺磁性和特异性,对食品中的福氏志贺氏菌在磁场中进行特异性捕获,实现对食品中福氏志贺氏菌的快速、高效、特异性分离和富集。……