茶树EGCG-O-甲基转移酶的纯化及酶学性质

吕海鹏，张 悦，费冬梅，林 智*

(中国农业科学院茶叶研究所，国家茶产业工程技术研究中心，浙江 杭州 310008)

近年来，茶叶中的甲基化儿茶素成分因其有显著的抗氧化、抗衰老、抗过敏等功效引起了科研工作者的关注；目前已在相关资源筛选[1-2]、基因克隆[3-4]以及生物活性评价[5-6]等方面取得了很大的研究进展。然而，甲基儿茶素的天然资源十分有限，只有极少数的茶树品种中的甲基儿茶素含量在1%以上[7-9]，加之由化学合成途径获得甲基儿茶素相对困难。因此，为了开发利用这种天然功能成分，甲基儿茶素的酶学合成更具有重要的研究意义[10-11]。

在酶学合成方面，笔者所在的研究团队在前期的研究过程中，首先研究了重组大肠杆菌内EGCG-O-甲基转移酶(EOMT)的诱导表达条件[12]；继而分析推断出EGCG-O-甲基转移酶催化EGCG后生成的不同类型的EGCG甲基化衍生物[13]；并查明了甲基化衍生物酶促合成的反应条件[14]；但在实验过程中发现，EGCG-O-甲基转移酶粗酶液的比活力很低，致使甲基化儿茶素的得率也比较低；因此，十分有必要对该酶进行分离纯化从而提高其催化活性。

本研究拟在上述研究基础之上，进一步开展EGCG-O-甲基转移酶的分离纯化研究，并查明其酶学特性，以期获得纯度较高、活性较强的EGCG-O-甲基转移酶。该结果将有助于研究甲基化EGCG的酶学合成技术从而实现后续较大规模的甲基化儿茶素的酶法制备，也有助于进一步研制开发甲基儿茶素相关的新型功能食品和天然药物等。……