黑曲霉ZJUQH产α-半乳糖苷酶的固体发酵培养基优化研究

徐腾洋，方若思，董亚晨，陈启和*

(浙江大学食品科学与营养系，浙江省食品微生物技术研究重点实验室，浙江 杭州 310058)

α-半乳糖苷酶(α-galactosidase，EC 3.2.1.22) 属外切糖苷酶类，特异性水解半乳糖类寡糖和多聚半乳-(葡)甘露聚糖的非还原性末端α-1,6-半乳糖苷键。因此它能水解蜜二糖、棉子糖、水苏糖和毛蕊花糖等低聚糖，也能水解半乳甘露聚糖、糖复合物(如糖蛋白类和糖脂类)中的α-半乳糖苷键[1-2]。1895年Bau首次从管底酵母(bottom yeast)中分离出α-半乳糖苷酶，但是直到20世纪80年代，人们才开始对α-半乳糖苷酶进行大规模的深入研究。它来源于微生物、植物和动物，以单体、二聚体、三聚体或四聚体形式存在；尤以微生物的产量高，如如双歧杆菌(Bifidobacterium)、黑曲霉菌(Aspergillus niger)[3]等。同时，该酶在食品、医药、饲料工业等领域得到广泛应用。

固体发酵(solid-state fermentation，SSF)在食品酶的发酵生产中具有很大潜力，如生产成本低、能源消耗少[4-5]等，同时还可能使酶具有更优良的作用性质[6-7]。响应面法(response surface methodology，RSM)是利用合理的实验设计并通过实验得到一定数据，采用多元二次方程来拟合因素和响应值之间的函数关系，通过对回归方程的分析来寻求最优工艺。该法已广泛应用于产酶培养基组成的优化[8-9]。本实验主要通过用响应面法优化黑曲霉ZJUQH的固体发酵培养基来提高α-半乳糖苷酶酶活，以获得高产α-半乳糖苷酶的合适固体发酵培养基组成。

1 材料与方法

1.1 菌种

保藏于中国科学院微生物研究所的黑曲霉ZJUQH，保藏号为CGMCC No.6152。

1.2 试剂

麸皮 杭州市东南面粉厂；豆粕(质量标准为一级) 南京蛋白厂；……