交联壳聚糖载体固定化柚苷酶工艺

雷生姣，余海立，黄 超，郑兴龙

(三峡大学化学与生命科学学院，湖北 宜昌 443002)

壳聚糖又名氨基葡萄糖，是由氨基-D-葡萄糖和N-乙酰基-D-氨基葡萄糖通过β-(1,4)糖苷键连接起来的直链多糖，它是目前发现的唯一的一种天然碱性多糖[1]。壳聚糖分子中除多糖结构以外，还含有丰富的羟基和氨基功能基团，易于进行化学修饰，因而具有许多独特的性能[2]。其在材料工业、化妆品、纺织、印染、造纸、生物医药、环保、农业等方面都具有广泛的用途[3-7]。壳聚糖分子中的羟基和氨基还可形成活泼界面，对蛋白质的亲合力非常高，是性能优良的固定化酶载体[8]。由于酶与载体结合力弱，酶易从吸附载体上脱落，因此常用吸附和交联结合方法提高其操作稳定性[9]。

柚苷酶(EC 3.2.1.40)具有α-L-鼠李糖苷酶和β-D-葡萄糖苷酶的活性，主要被应用于果汁的脱苦、鼠李糖生产、葡萄酒的增香以及制药工业[10-14]等多种领域，具有重要研究价值。随着柑橘深加工业的快速发展和对柚苷酶应用研究的不断深入，对柚苷酶的需求将会越来越大。

本研究以戊二醛交联的壳聚糖为载体，对壳聚糖固定化柚苷酶的影响因素进行研究，通过正交试验进一步优化其工艺，为固定化柚苷酶的拓展应用提供理论研究基础。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

柚苷酶(CAS号：9068-31-9，369U/g)、柚皮苷(HLPC 98%) 美国Sigma-Aldrich公司。

壳聚糖(脱乙酰度≥90.0%)、一缩二乙二醇(DEG)(化学纯) 国药集团化学试剂有限公司；戊二醛(体积分数为25%) 天津市科密欧化学试剂有限公司；其他试剂均为分析纯。……