生产用菌种筛选过程中西林控制的研究

(广东溢多利生物科技股份有限公司科研中心, 广东 珠海 519060)

谷氨酸发酵生产的水平首先取决于生产用菌种的性能。菌种在使用和保藏过程中会出现衰退现象，要稳定并提高发酵水平，必须定期对菌种进行分纯筛选，淘汰衰退的菌株，筛选出高产稳定的优良菌株供生产上使用。我厂是以甘蔗糖蜜为原料，采用在发酵对数生长期添加青霉素，然后再添加表面活性剂的发酵工艺。为了更好的服务于生产，根据实际操作情况，使得菌种筛选也尽量与生产发酵工艺相统一。

1 实验目的

1.1 根据生产用菌种的性能，摸索出一套合适的菌种筛选方法。

1.2 确定摇瓶筛选生产用菌种过程中西林的最佳控制时间和浓度。

2 实验原理

在发酵对数生长期早期添加青霉素能抑制菌体细胞壁的合成，形成不完全的细胞壁，进而导致形成不完全的细胞膜，除去阻碍谷氨酸向外渗透的障碍物，使得谷氨酸得以大量地积累。

作用机制：添加青霉素是抑制谷氨酸生产菌细胞壁的后期合成，主要是抑制糖肽转肽酶影响细胞壁肽聚糖的生物合成。因为青霉素的结构和革兰氏阳性的谷氨酸菌所特有的糖肽的D-Ala-D-Ala 末端结构类似，因而它取代合成糖肽的底物而和酶的活性中心结合，使五肽末端的丙氨酸不能被转肽酶移去，甘氨酸桥-头无法与它前面一个丙氨酸相接，因此交联不能形成，网状结构连接不起来，糖肽合成就不能完成，于是菌体内尿二磷和N-乙酰胞壁酸大量堆积，青霉素与转肽酶相结合，形成了青霉素的酶。……