人羊膜间充质干细胞静脉移植后在心肌梗死大鼠体内的定植及分化

王钰莹 方 宁 陈代雄 余丽梅 刘祖林 万 雪

(遵义医学院附属医院贵州省细胞工程重点实验室，贵州 遵义 563003)

成体干细胞(SSC)具有一定的发育潜能，在适当的条件下可分化成特化的组织细胞，而且来源较广，可体外扩增，不牵涉伦理学问题，因而在再生医学领域具有广阔的应用前景。人羊膜间充质干细胞(hAD-MSCs)也是一类典型的SSC，它具有易于体外扩增，无免疫原性、多分化潜能等优点，可以成为细胞移植治疗缺血性心肌病的一种有前途的新细胞来源〔1～4〕。移植途径是影响细胞移植治疗效果和安全性的重要因素，在动物实验和临床试验中采用的细胞移植途径包括心肌内注射、冠状动脉内注射、冠状静脉窦移植等。而经静脉内移植，由于可以反复、多次、大量进行无创的治疗，是最具有应用前景的治疗方法。本实验旨在观察静脉移植hAD-MSCs到心肌梗死 (MI)大鼠体内后在重要脏器的分布以及对心功能的影响，探讨静脉移植hAD-MSCs治疗MI的可行性和安全性。

1 材料与方法

1.1 材料 雄性SD大鼠，体重(200±20)g，购自第三军医大学大坪医院动物实验中心〔许可证号:SCXK(渝)2007-0005〕。LG-DMEM培养基、胎牛血清(FBS)购自Gibco公司，5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brdu)、鼠抗人Brdu抗体、α-辅肌动蛋白抗体购自Sigma公司，连接蛋白-43(CX-43)抗体、羊抗鼠IgG-FITC、羊抗兔Ig-Texas Red购自Santa Cruz公司，鼠抗人细胞核特异性抗体MAB1281、结蛋白抗体购自Chemcion公司，免疫组化单染试剂盒(EnVisionTMDetection Systems Peroxidase/DAB，兔/鼠)购自Gene Tech公司，用于流式细胞仪检测的全部荧光标记抗体均购自BD公司，彩色多普勒超声心动图仪为德国ACUSON公司产品(型号Sequoia512)。

1.2 hAD-MSCs分离……