非洲马瘟病毒实时荧光定量RT－PCR 检测方法的建立

赵文华，杨仕标，李富祥

（云南省畜牧兽医科学院 国家外来动物疫病诊断实验室 云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室，云南昆明650224）

非洲马瘟（African horse sickness，AHS）是由呼肠病毒科（Reoviridae）环状病毒属（Orbivirus）的非洲马瘟病毒（AHSV）引起的感染所有马科动物的一种非接触性病毒性传染病。本病以呼吸系统和循环系统的病理变化为特征，目前发现至少有2种库蠓属昆虫可传播该病，至少存在9个血清型。AHS在非洲的撒哈拉地区呈地方性流行，也曾在非洲北部、中东、欧洲发生，该病的发生呈季节性。易感动物感染后的病死率最高可达95%，一旦暴发会给养马业造成巨大的经济损失，因此世界动物卫生组织（OIE）将其列为必须通报的动物疫病，我国将其列为一类动物疫病［1－2］。

鉴于该病的严重性和对养马业的毁灭性打击，在国家及国际间流动的马匹必须要进行严格的动物检疫，尤其是在地方流行区及无该疫病区域之间流动的马匹更应该进行该病的检疫。国际赛马活动的普及以及马胚质资源的流动，边境地区非法走私马匹活动的存在，全球气候变暖引发生态系统改变进而使病原微生物生态变化等，种种因素皆可能造成AHS在非地方流行区域的暴发流行［3］。我国目前虽为AHS无疫区，但随时面临该外来病被引入的风险，因此有必要对该类外来动物疫病进行相应检测、监测技术的贮备。本研究在已建立AHSV群、型特异 RT－PCR 检 测 方 法 的 基 础 上［4－5］，选 择 保 守 的VP7蛋白基因S7区段设计一对特异性引物，用实时荧光定量RT－PCR方法对AHSV的快速定性和定量检测。……