短肽RADA16-1自组装纤维长度与止血关系研究

李佳楠，钟小忠，王 婷

（1.江汉大学 生命科学学院生物技术系，湖北 武汉 430056； 2.成都大学，四川 成都 610041）

临床外科手术止血，尤其是在中枢神经系统外科手术中如何快速止血是一个难点。快速止血可使流血所造成的神经组织继发性损伤降低，减少病人神经系统的损伤。而在之前的研究中，有报道使用自组装短肽溶液可以在实验动物不同组织中完成快速止血的现象，完全止血时间小于20 s［1］。该过程未借助压力，烙烧，血管收缩，凝结和交联附着物（cross-linked adhesives）等传统的外科止血方法［2-4］。这种快速止血效果对神经外科手术中减少流血对神经组织的损伤以及野外急救有着极其重要的意义。并且，已有实验证明该短肽溶液可以减少中枢神经组织急性创伤后的神经细胞凋亡（TUNEL法）［5］。

在本研究中，自组装短肽RADA16-1自组装形成的长纤维首先通过超声处理破坏，通过圆二色谱仪、原子力显微镜和流变仪研究了自组装短肽RADA16-1在水溶液中的自组装动力学特征。同时，以SD大鼠脊髓全横断（T8）和肝脏横切作为创伤出血模型，统计短肽溶液的止血时间，分析短肽纤维长度及形成的水凝胶的黏度与止血时间的相关性。该研究可对了解短肽自组装过程和自组装短肽止血机理，完善RADA16-1的止血应用开发提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 短肽样品制备

短肽RADA16-1分子式为RADARADA⁃RADARADA（RADA16-1），由上海波肽多肽合成实验室合成和纯化（该多肽分子量为1712 ku，纯度大于95%）。实验前短肽RADA16-1用去离子水溶解至终浓度1%，再经超声处理1 min后用0.22 μm的滤膜过滤，无菌分装室温保存备用。……