P53和Ki-67在水泡状胎块中的表达及意义

王亚萍 刘玲 于晶功 李广慧 宋光耀 邹娜

P53和Ki-67在水泡状胎块中的表达及意义

王亚萍 刘玲 于晶功 李广慧 宋光耀 邹娜

目的研究P53及Ki-67在水泡状胎块(完全性和部分性水泡状胎块，CHM和PHM)中的表达情况，探讨其在水泡状胎块诊断及判断预后中的作用。方法应用免疫组织化学方法检测P53及Ki-67在12例胚亡流产绒毛、18例PHM和24例CHM中的表达。结果P53在三组中的阳性表达率分别为0.00%、33.33%和50.00%；Ki-67的阳性表达率分别为16.67%、44.44%和83.33%；P53的表达在各组间的差异没有统计学意义(P>0.05)；Ki-67的表达在CHM组与正常组间差异有统计学意义(χ2=4.4444，P=0.0350，P<0.05)，而CHM与PHM之间以及PHM与正常组之间差异不明显(P>0.05)。结论检测水泡状胎块中P53及Ki-67的表达有助于HM的诊断及预后评估。

水泡状胎块；P53；Ki-67

水泡状胎块(hydatidiform mole,HM)是常见的妊娠滋养细胞疾病，根据大体所见、显微镜下特点、染色体核型分析以及临床表现不同而分为完全性水泡状胎块(complete hydatidiform mole,CHM)和部分性水泡状胎块(partial hydatidiform mole,PHM)。本文通过免疫组化方法检测P53及Ki-67在不同类型的HM中的表达情况，来探讨它们在HM诊断中的作用及预后价值的评估。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取大连市妇产医院2011年10月至2012年8月期间门诊患者首次刮宫标本，其中24例为CHM患者，年龄24～40岁，中位年龄为26.12岁；18例为PHM患者，年龄21～45岁，中位年龄为25.57岁。所有病例均由2名高年资病理医师再次复核(诊断标准参照WHO2003乳腺及女性生殖器官病理学和遗传学)。另选取2012年8至10月间12例胚亡流产绒毛组织作为对照组。

1.2主要试剂及方法 所用即用型鼠抗人P53及Ki-67单克隆抗体和S-P试剂盒均购自福州迈新生物技术开发公司。所有标本均由10%福尔马林固定，石蜡包埋后4 μm连续切片。采用免疫组化S-P法染色操作。用已知阳性切片做阳性对照，用磷酸盐缓冲液(PBS)代替一抗做阴性对照。

1.3结果判定 P53及Ki-67阳性表达定位于细胞核，均为浅黄色或棕黄褐色颗粒。阳性判断为滋养细胞阳性数<5%为(-)，5%～25%为(+)，26%～50%(++)，>50%为(+++)。

1.4统计学分析 采用 SPSS 13.0统计软件进行χ2检验, 以P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1P53表达状况 CHM组中P53阳性率为50.00%(12/24)；PHM组阳性率为33.33%(6/18)；正常组阳性率为0.00%(0/12)。P53在正常组、PHM及CHM组中的表达呈上升趋势，在CHM组中表达最强，但各组间表达的差异没有统计学意义(P>0.05)。见表1。

2.2Ki-67表达状况 CHM组中Ki-67阳性率为83.33%(20/24)；PHM组阳性率为44.44%(8/18)；正常组阳性率为16.67%(2/12)。Ki-67在正常组、PHM及CHM组中的表达逐渐升高，在CHM组中表达最强，CHM组与正常组之间有明显差异(χ2=4.4444，P=0.0350，P<0.05)，而CHM与PHM之间以及PHM与正常组之间差异不明显。见表1。

3 讨论

水泡状胎块，俗称葡萄胎，是临床工作中常见的妊娠滋养细胞疾病，主要以绒毛水肿及不同程度滋养细胞增生为特点。虽然大部分呈现良性病程，但也有某些病例具有潜在恶性经过，可能发展为侵袭性水泡状胎块、绒毛膜癌及其他妊娠滋养细胞肿瘤。有报道称5%～15%的葡萄胎患者会发展为妊娠滋养细胞肿瘤而需要进一步化疗，而当15%的患者发现发展为妊娠滋养细胞肿瘤时，仅有1%～5%的部分性葡萄胎患者由于持续性滋养细胞疾病(pGTD)而需要化疗[1]。所以，完全性水泡状胎块较之部分性而言，其预后更需要关注，但在临床工作中对于CHM和PHM的鉴别在一些病例上存在着一定的困难，而预测预后最重要的标准是部分性和完全性胎块之间的鉴别[2]。

P53作为抑癌基因参与细胞周期调节而发挥功能。有研究表明P53在HM中的表达强于普通绒毛组织；也有报道P53在CHM中的阳性表达率为40%，在PHM中的阳性表达率为30%，非水泡组织为10%；还有作者发现在那些发展为pGTD的CHM中P53的表达更强[3]。但是也有研究表明在妊娠滋养细胞疾病中未检测到P53突变[4]。Petignat P等[5]研究发现在81%的HM中可观察到突变型P53，认为相比于正常胎盘而言，HM中突变型P53的增加可能是一种不同多肽链折叠或锚定蛋白形成，而不是真的基因突变，可能引起不同的生物活性。本实验中P53在CHM中的表达率为50%，在PHM中的表达率为33.33%，CHM组比PHM组稍高，但没有统计学意义，考虑可能是选取的样本数偏小所致。

Ki-67是反映细胞增殖活性的生物学指标，已经广泛应用于检测肿瘤细胞的增生程度，在多种肿瘤中的表达显著升高。本实验结果显示，Ki-67的表达从正常组到PHM组再到CHM组是逐渐增强的，而且在CHM组的表达显著升高，CHM组及PHM组的表达明显强于正常组，这与罗莹等[6]的研究结果相似，而CHM组与PHM组之间的表达，CHM组要高于PHM组，前者阳性表达细胞数多>50%，后者通常在20-30%之间，但是表达率无明显差异(P>0.05)。流产的病例中细胞滋养层细胞增殖速度变慢，增殖活性下降，因而本实验中观测到Ki-67在水肿绒毛滋养细胞中的阳性细胞数大多<5%。CHM组与正常组之间差异有统计学意义(P<0.05)，因而考虑Ki-67可以作为CHM诊断时的一个参考指标，Ki-67表达越强，越需要监测其预后，相对于Ki-67低表达的病例而言其发展为pGTD的可能性会大一些。

综上所述，结合临床所见、镜下形态特点以及P53和Ki-67的表达，有助于水泡状胎块的诊断及预后的评估。

表1 水泡状胎块中P53及Ki-67的表达状况

注：①CHM-PHM②PHM-正常组③CHM-正常组

[1] 陈乐真主编.妇产科诊断病理学.第2版.北京：人民军医出版社，2010:554.

[2] 刘伯宁，范嫏娣主译.人类胎盘病理学手册.天津：天津科技翻译出版公司，2008:271.

[3] Neil J. Sebire, F.R.C.Path., Michael J. Seckl. Immunohistochemical staining for diagnosis and prognostic assessment of hydatidiform moles. The Journal of Reproductive Medicine, 2010,55:236-246.

[4] Sue Yazaki-Sun, Silvia Daher, Marcia Marcelino de Souza Ishigai, et al. Correlation of c-erbB-2 oncogene and p53 tumor suppressor gene with malignant transformation of hydatidiform.J. Obstet. Gynaecol. Res, 2006,32(3):265-272.

[5] Petignat P, Laurini R, Goffin F, et al. Expression of matrix metalloproteinase-2 and mutant p53 is increased in hydatidiform mole as compared with normal placenta. Int J Gynecol Cancer, 2006,16:1679-1684.

[6] 罗莹，吴荔香，廖翏，等.水泡状胎块中p57、survivin、Ki-67的表达及意义.临床与实验病理学杂志,2012,28(2):202-204.

116033 大连市妇产医院病理科