锈叶杜鹃授粉花柱的显微观察与自交亲和性分析

解玮佳，白 天，李世峰* ，关文灵，宋 杰，彭绿春，李树发，蔡艳飞，陆 琳

(1.云南省农业科学院 花卉研究所，云南 昆明 650205;2.云南省花卉育种重点实验室，云南 昆明 650205;3.云南省花卉工程中心，云南 昆明 650205;4.云南农业大学 园林园艺学院，云南 昆明 650201)

锈叶杜鹃(Rhododendron siderophyllum)为杜鹃属(Rhododendron)杜鹃亚属(Subgen.Rhododendron)杜鹃组(Sect.Rhododendron)三花杜鹃亚组(Subsect.Triflora)植物［1］，其具有花期早，移栽成活率高等特点［2］，是选育早花杜鹃品种的优良种质资源。作为育种材料，了解其自交亲和性和自花授粉结实率等生殖生物学特性，对于杂交育种工作的顺利进行至关重要。近年来，利用胼胝质荧光反应观察榛子(Corylus avellana)［3］、苹果(Malus pumila)［4］等植物的花粉和雌蕊相互作用以检测其自交亲和性的研究已有报道，而在杜鹃花上尚未有相关研究。本实验采用苯胺蓝荧光显微技术对锈叶杜鹃自交授粉后花粉在其花柱中的生长过程进行观察，对其自交亲和性进行鉴定，旨在为今后开展锈叶杜鹃的杂交育种工作奠定基础。

1 材料和方法

1.1 材料

试验材料来自位于昆明阿子营乡N 25°23'、E 102°73'，海拔2 240～2 270 m地带的锈叶杜鹃自然居群。

1.2 试验方法

1.2.1 自花授粉 2012年3月8日—9月17日，选取生长健壮的植株，在松蕾期去雄，然后套硫酸纸袋隔离，并将不同植株上摘下的花药分别收集在不同的干净硫酸纸袋中，做好标记，带回室内，置于通风处阴干，待花粉散出后，带回野外进行同株自交授粉，授粉后再套硫酸纸袋隔离。授粉花朵数不低于150朵花。

1.2.2 荧光显微镜观察 花柱压片参照Williams等［7］的方法，分别取自花、异花授粉后2，4，8，12，24，48，76 h雌蕊放入 FAA 固定液(V(甲醛)∶V(冰醋酸)∶V(70%乙醇)=1∶1∶18)中固定4 h，随后转入体积分数70%的酒精中，4℃冰箱中保存备用。……