尿路感染大肠埃希菌的耐药性分析

丁士标 计仁华 潘亚萍 李召东 浙江省中西医结合医院检验科 杭州310003

大肠埃希菌是尿路感染最常见的致病菌，耐药性大肠埃希菌的出现增加了临床治疗难度，产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌往往呈现多重耐药性。为了解大肠埃希菌的耐药情况，对我院临床送检的尿液标本中分离到的大肠埃希菌进行药物敏感性分析，以期为临床用药及医院感染控制提供参考。

1 材料与方法

1.1 菌株来源 743 株大肠埃希菌来自2010年1月—2012年6月我院门诊及住院患者首次送检的尿液标本经常规分离培养获得，其中门诊106 株，住院637 株。

1.2 菌株鉴定及药敏 采用法国生物梅里埃公司VITEK 2 compact 全自动微生物分析系统进行菌株鉴定及药敏试验，操作按仪器说明书进行。头孢哌酮/舒巴坦采用纸片扩散法，药敏结果参照头孢哌酮标准，药敏纸片和MH 琼脂均购自英国OXOID 公司。药敏结果统计标准均按照CLSI 2010 版执行。质控菌株为大肠埃希菌25922。

1.3 ESBLs 表型确证试验 按CLSI 2010 版推荐标准，头孢噻肟（30μg）和头孢噻肟/克拉维酸（30/10μg）、头孢他啶（30μg）和头孢他啶/克拉维酸（30/10μg），对两组中任一组药物，在加克拉维酸后，抑菌圈与不加克拉维酸的相比，增加值≥5mm 时，判定为产ESBLs。阴性质控菌株为大肠埃希菌25922，阳性质控菌株为肺炎克雷伯杆菌700603。

1.4 观察项目 应用WHONET5.4 软件计算菌株数和耐药百分率。

2 结果

743 株大肠埃希菌对氨苄西林耐药率最高（82.9%），其次为头孢唑啉（79.0%）；对氨苄西林/舒巴坦、头孢曲松、氨曲南、喹喏酮类、庆大霉素、妥布霉素和复方新诺明耐药率40%～60%，对头孢他啶和头孢吡肟耐药率分别为24.5%、16.0%；对阿米卡星、亚胺培南、头孢替坦、呋喃妥因、哌拉西林/他唑巴坦和头孢哌酮/舒巴坦耐药率均在10%以下。743 株大肠埃希菌中检出产ESBLs 382 株（51.4%），非产ESBLs 361 株（48.6%）。产ESBLs 菌株的耐药率普遍高于非产ESBLs 菌株，见表1。

3 讨论

细菌耐药正越来越成为全球关注的问题。大肠埃希菌属肠道正常菌群，是引起尿路感染最主要的病原菌[1]。本组药敏检测结果显示，大肠埃希菌对不同种类抗菌药物耐药程度不一，β-内酰胺类中头孢他啶和头孢吡肟耐药率较低，分别为23.9%和15.6%，而其他β-内酰胺类药物均＞50%，喹喏酮类、磺胺类和氨基糖苷类（除阿米卡星）均＞44.7%，总体来看，已呈现多重耐药趋势。呋喃妥因、亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星和头孢替坦表现出良好的抗菌活性，耐药率均在10%以下，表明上述药物可用于尿路感染治疗的经验性用药。

ESBLs 是由质粒或染色体介导的能水解大多数青霉素类、头孢菌素类和氨曲南的β-内酰胺酶，是大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌的主要耐药机制[2]。产酶菌株感染的患者在病死率、住院时间和治疗费用上均高于非产ESBLs 菌株感染的患者[3]。根据CLSI推荐的ESBLs 确证方法，本组资料743 株大肠杆菌共检出382 株ESBLs 阳性株，检出率高达51.4%。本研究发现，产ESBLs 株对头孢曲松的耐药率（97.9%）明显高于头孢他啶（43.2%）和头孢吡肟（27.9%），这可能与我国流行的ESBLs 基因型（CTX-M）有关[4]。需要指出的是，产ESBLs 菌株往往同时携带氨基糖苷类、喹喏酮类和磺胺类耐药基因，造成多重耐药性，增加临床治疗难度[5]。本研究结果也表明，产ESBLs大肠埃希菌对氨基糖苷类、喹喏酮类和磺胺类药物的耐药率明显高于非产ESBLs 株。

β-内酰胺酶抑制剂能有效抑制ESBLs的活性，本组资料显示β-内酰胺类联用β-内酰胺酶抑制剂增强了前者的抗菌活性。已知碳青霉烯类如亚胺培南是目前治疗产ESBLs 多重耐药菌最有效的药物。值得注意是的，我们在产ESBLs 和非产ESBLs 大肠埃希菌中均检出了耐亚胺培南的菌株，说明大肠埃希菌耐药机制越来越复杂，可能与碳青霉烯酶产生、膜孔蛋白丢失等有关[6]，同时也警示临床必须合理应用碳青霉烯类抗生素，防止在抗生素压力下产生泛耐药大肠埃希菌。

表1 743 株大肠埃希菌对常用抗生素耐药性分析

尿路感染是临床常见感染性疾病，耐药菌株感染将给临床治疗带来较大的困难，增加了尿路感染复发的风险。因此，加强细菌耐药性监测，了解细菌耐药特性，以指导和规范临床合理用药，提高临床治愈率和控制医院感染。

［1］符国祥，陈开森.临床尿标本分离128 株大肠埃希菌分析［J］.中国微生态学杂志，2009，21（21）：1029-1032.

［2］Clinical and Laboratory Standards Institute.Performance standards for antimicrobial susceptibility testing.Twentieth informational supplement.M100-S20.Clinical and Laboratory Standards Institute，Wayne，PA，2010.

［3］Tumbarello M，Spanu T，Sanguinetti M，et al.Bloodstream infections caused by extend-spectrum-β-lactamase-producing klebisella pneumoniae:risk factors,molecular epidemiology and clinical outcome［J］.Antomicrob Agents Chemother，2006，50：498-504.

［4］Wang H，KellKar S，Wu W，et al.Clinical isolates of Enterobacteriaceae producing extended-spectrum β-lactamases:prevalence of CTX-M-3 at a hospital in china［J］.Antimicrob Agents Chemother，2003，47：790-793.

［5］林菲菲，毛剑锋，金晶，等.尿路感染病原菌分布及大肠埃希菌的耐药性变迁［J］.中华医院感染学杂志，2011，21（24）：5302-5304.

［6］杨启文，王辉，徐英春，等.2009年中国13 家教学医院院内感染病原菌的抗生素耐药性监测［J］.中华检验医学杂志，2011，34（5）：422-424.