全反式维甲酸对人肝癌SMMC－7721细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其分子机制

李海燕，曹励民，贺红艳，黄凤霞

（西安医学院医学技术系，陕西 西安 710021）

原发性肝癌是最常见的恶性肿瘤之一，其复发、转移影响了肝癌患者的预后。抑制肝癌复发、转移可延长肝癌患者的生存期，改善其生活质量。全反式维甲酸（all－trans retinoic acid，ATRA）为维生素A的氧化代谢产物，是常用的诱导分化剂。近年研究［1－3］发现：ATRA 及其衍生物除广泛应用于白血病的治疗外，体内外实验还证实其可促进多种实体瘤细胞的分化，明显抑制乳腺癌、肝癌和胃癌细胞等的侵袭和转移。ATRA诱导分化对肿瘤细胞的侵袭、转移可能具有一定的预防和治疗作用，但具体的分子机制尚不十分清楚。因此本文作者探讨ATRA对人肝癌细胞株SMMC－7721增殖、迁移和侵袭能力的影响及其分子机制，旨在为ATRA用于肝癌的临床治疗提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 细胞及主要试剂 人肝癌细胞株SMMC－7721引自中国科学院上海细胞生物研究所；ATRA购自Sigma公司，用二甲基亚矾（DMSO）配制浓度为10mmol·L－1的存储液，分装后于－20℃避光保存。RPMI 1640培养基（Gibco公司），小牛血清（杭州四季青生物工程公司），Transwell小室（3428型，美国 Coming公司），Matrigel（5g·L－1），美国BD公司），Total RNA Kit（美国 Omega 公司），Fluorophore Sybr Green（Netherlands公司）。BCA蛋白定量检测试剂盒（美国Pierce公司），ECL发光检测试剂盒（北京中杉金桥生物技术有限公司），胰蛋白酶（Amresco公司），基质金属蛋白酶9（MMP－9）和α－tublin一抗（美国ABCAM公司）。

1.2 细胞培养 人肝癌细胞株SMMC－7721培养于含有10%小牛血清的RPMI 1640培养液中，在5%CO2浓度、饱和湿度及37℃孵育箱中培养，3～4d传代1次，选取对数生长期的细胞进行实验。

1.3 实验分组将处于对数生长期的SMMC－7721细胞分为空白对照组和10、20和40μmol·L－1ATRA组。……