721型分光光度计使用方法及注意事项

武开业

（榆林市环境监测总站，陕西 榆林 719000）

1 721分光光度计的使用方法

1）在接通电源之前，电表的指针必须位于“0”刻度线，否则应旋转电表上的校正螺丝调节到位。

2）打开比色皿室的箱盖和电源开关，使光电管在无光照射的情况下预热15min以上。

3）旋转波长调节器，选择测定所需的单色光波长。选择适当的灵敏度，一般先将灵敏度旋钮调至中间位置，用零点调节器调节电表指针至T值为10%处。若不能调到，应适当增加灵敏度。

4）放入空白溶液和待测溶液，使空白溶液置于光路中，盖上比色皿室箱盖，使光电管受光，调节光量调节旋钮使电表在T值为100%处。

5）打开比色皿室箱盖（关闭光门），调节零点调节器使指针在T值为0%处，然后盖上箱盖（打开光门），调节光量调节旋钮使指针在T值为100%处。如此反复调节，直到关闭光门时和打开光门时指针分别在T值为0%和100%处为止。

6）将待测溶液置于光路中，盖上箱盖，由此时指针的位置读得待测溶液的T值或A值。

7）测量完毕后，关闭开关，取下电源插头，取出比色皿洗净擦干、放好。盖好比色皿暗箱，盖好仪器。

2 721分光光度计的使用注意事项

1）使用比色皿，只能拿毛玻璃的两面，并且必须用擦镜纸擦干透光面，以保护透光面不受损坏或产生斑痕。在用比色皿装液前必须用所装溶液冲洗3次，以免改变溶液的浓度。比色皿在放入比色架时，应尽量使它们的前后位置一致，以减少测量误差。

2）需要大幅度改变波长时，在调整T值为0%和100%之后，应稍等片刻（因钨丝灯在急剧改变亮度后，需要一段热平衡时间），待指针稳定后再调整T值为0%和100%。

3）当被测溶液浓度太大时，可在空白溶液处加一块中性滤光片（所谓中性是指它们在很宽的波长范围内的透光率基本相同），其A值有0.5、1和1.5三种。所谓A值为1是标称值，实际在1左右，须经使用的仪器在实际使用的波长下测定其实际数值，例如∶测得吸光片的实际数值为0.95，在空白溶液处加此吸光片后，被测溶液在电表上的读数为0.74，则该溶液的实际值为∶0.74+0.95=1.69

4）根据溶液的含量大小选择不同光程长度的比色皿，使电表读数A值在0.1～1之间，这样可以得到较高的准确度。

5）为确保仪器工作稳定，在电源电压波动较大的地方，应加一个稳定电源。同时仪器应保持接地良好。

6）在仪器的底部有两只干燥剂筒，应经常检查。发现干燥剂失效时，应立即更换或烘干后再用。比色皿暗箱内的硅胶也应定期取出烘干后再放回原处。

7）为了避免仪器积灰和沾污，在停止工作时，应用罩子罩住仪器。仪器在工作几个月或经搬动后，要检查波长的准确性，以确保仪器的正常使用和测定结果的可靠性。

3 721分光光度计的校正方法

波长读数校正的方法很多，例如：（1）可用波长精度很高的干涉滤光片；（2）已知吸收峰（λ最大）波长的有色物质的溶液等做标准来校正。前一种方法需要特殊的设备，其精确度较高；后一种方法简易可行，精确度较差，但对721型分光光度计来说，这种方法已能够满足要求。

配制一已知λ最大的物质的适当浓度的溶液，用待校正的仪器在该物质的λ最大±20nm范围内，用不同的波长测定其A值。可从小于该有色溶液的λ最大约20nm处开始，每隔2nm测定一次，至波长大于该溶液λ最大的约20nm为止。例如用高锰酸钾溶液来校正，其λ最大为525nm。故在505至545nm之间，每隔2nm测定一次吸光度。将测定结果作吸收曲线，所得曲线有一吸收峰（若未所得曲线未呈现吸收峰，则表示此仪器波长读数偏差大于20nm，应扩大测定的波长范围），设此吸收峰的波长为λ′最大，将它与已知的λ最大比较，其差即为波长校正值，以λ校表示：

若波长校正值λ校很大，则需要重新调整励光灯泡，或检修单色器的光学系统。若波长校正值小于10nm，则可在使用该仪器时，用校正值来校正波长。当λ校为正值时，表示该仪器的波长读数较真实的波长偏高。因此在使用该仪器时，若测定某一溶液时所需选定的波长为λ测，那么应调至的波长读数（λ读）则为∶

例如用高锰酸钾溶液（其λ最大为525nm）校正一仪器，测得其吸收峰λ′最大为530nm，则：

用该仪器测定邻菲罗啉铁时，应选用的波长为510nm，其波长读数标尺应旋至λ读：λ 读＝λ 测-λ 校＝510nm-（-5nm）＝515nm

即波长读数应调至515nm，而此时真实的波长为510nm，即邻菲罗啉铁的λ最大。

4 小结

721分光光度计使用方便，能耗低，稳定性好，便于调校，准确度比较高，使用范围比较宽，所以仍将在分析化验领域内发挥重要的作用。