胶质细胞源性神经营养因子对帕金森病大鼠多巴胺能神经元的修复作用

许加军，杨洪安，王国栋

(山东大学附属省立医院，济南250021)

胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)有保护多巴胺能神经元和修复其损伤的作用［1～3］，保护作用通常发生在损伤即刻，持续数小时，而修复作用通常在伤后数天至数周才表现出来，并持续较长时间。如在神经元损伤后数小时内或损伤前预防给药，以保护作用为主;如给药覆盖帕金森病整个病程，则以修复作用为主。2013年10～12月，我们向帕金森病模型大鼠脑室或壳核内直接注射GDNF，观察其对大鼠黑质纹状体系统多巴胺能神经元的修复作用。现报告如下。

1 材料与方法

1.1 动物模型的制备 健康雄性SD70大鼠，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供。常规饲养，自由进食水。2%戊巴比妥钠(40 mg/kg)腹腔注射麻醉，固定于立体定向仪。以前囟为标准参考点，参照大鼠脑立体定位图谱，于右侧前脑内侧束(MFB，A/P:－ 3.6 mm;L:+2.0 mm;V:－ 9.0 mm)及腹侧被盖区(VTA，A/P:－6.0 mm;L:+0.5 mm;V:－8.0 mm)分别立体定向注入12 μg 6-OHDA(3 μg/μL)，注射速度为 1 μL/min，经 2周的跟踪监测，获得39只稳定对侧旋转的帕金森病模型［4］。腹腔麻醉下应用立体定向技术分别在20只大鼠右侧脑室近纹状体侧和19只大鼠双侧壳核中央部放置微型导管(外径0.5 mm)。导管通过一段软管接于埋于侧腹部皮下的缓释泵［5］。无论是单侧脑室置管还是双侧壳核置管，GDNF均能作用于双侧脑区。

1.2 GDNF给药方法 术后1周内所有造模成功大鼠每日通过导管输注赋形剂(10 mmol/L枸橼酸盐、150 mmmol/L NaCl缓冲液)。术后2～3周，15只大鼠(观察A组)脑室内注射人重组GDNF，7.5 μg/d;14只(观察B组)壳核内注射人重组GDNF，7.5 μg/d;5只(对照 A 组)脑室内注射赋形剂，5只(对照B组)壳核内注射赋形剂至实验结束。……