陈海燕,杨 旭,王沛靓
(新疆医科大学第五附属医院,乌鲁木齐830011)
纤维化是机体组织受外界因素刺激后的一种修复过程,表现为细胞外基质的过度沉积[1]。放射性纤维化是恶性肿瘤患者临床放射治疗后常见并发症[2]。放疗是盆腔肿瘤主要的治疗手段,大剂量放射治疗可导致盆腔纤维化,包括直肠纤维化、输尿管纤维化,严重者会诱发淋巴管阻塞和输尿管梗阻[3]。研究发现,细胞因子在纤维化的形成过程中扮演重要角色,转化生长因子(TGF-β)是盆腔放射性纤维化的关键因子[4]。2013年3~7月,我们对新西兰大白兔给予放射线照射,探讨放射性纤维化的形成机制。
1.1 材料 清洁级雌性新西兰大白兔20只,体质量(2 000 ±200)g。TGF-β(mRNA)ISH DIG Kit购自天津颢洋生物制品科技有限责任公司;鼠抗兔Ⅲ型胶原单克隆抗体IgG购自美国Merck公司;NF-κB多克隆抗体、TGF-β多克隆抗体购自美国Santa Cruze公司;SP免疫组化试剂盒及浓缩型DAB试剂盒均购自日本株式会社同仁化学研究所。
1.2 方法
1.2.1 照射方法 将兔随机分成空白对照组、照射4周组、照射12周组和照射16周组,采用6%水合氯醛腹腔注射麻醉,固定四肢,首先确定X射线模拟机照射范围,照射视野为耻骨联合至耻骨联合上缘4 cm,腹白线左右2 cm,视野范围4 cm×4 cm。消毒腹部皮肤后,沿腹正中线切开,进入腹腔,给予6 MeV β射线单次大剂量照射,照射距离为100 cm,剂量为20 Gy,剂量率为400 cGy/min。照射结束后关腹,缝合。空白对照组操作过程同放射组,但不进行射线照射。术后室温、常规饲养,自术后第2天开始皮下注射雌二醇0.05 mg/d,持续4 d。……