TNF-α、MMP-2及VEGF在大隐静脉曲张形成中的作用

张 陈，雷跃华，李 曦，冯会和，付召君，魏 健，杨玉辉，王 勇

(自贡市第四人民医院，四川自贡643000)

大隐静脉曲张血管形成是发生于曲张大隐静脉中平滑肌细胞和细胞外基质等主要成分的结构改变，是静脉血管壁组织系统适应来自各种病理状态所发生的自身代偿的结果。肿瘤坏死因子α(TNF-α)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)及血管内皮细胞生长因子(VEGF)在大隐静脉的形成中具有重要作用。本研究通过检测曲张大隐静脉组织标本中TNF-α、MMP-2、VEGF 的表达，探讨三者在大隐静脉曲张形成中的作用。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择2012年1～12月我院收治的大隐静脉曲张患者40例，男27例、女13例，年龄35～75岁、平均59岁。均符合《黄家驷外科学》(第8版)、《外科学》(第8版)中的诊断标准，排除有活动性下肢溃疡并感染、深静脉血栓，伴严重心、脑、肺疾病，伴糖尿病及其他系统感染者。根据曲张静脉管壁厚度分为萎缩(管壁厚度＜409 μm)组17例，增生(管壁厚度≥409 μm)组23例。选择同期需要移植使用的、外伤需截肢的15例正常大隐静脉血管作为对照组，患者男9例、女6例，年龄15～72岁、平均51岁。

1.2 方法

1.2.1 标本制作及 TNF-α、MMP-2、VEGF 表达检测

采用无损伤原则保护切取的静脉血管标本(曲张静脉切取明显迂曲扩张部及扩张部中间之血管壁)，常规固定包埋，HE染色，切成5～8 μm厚的切片，组织切片完全脱蜡和水化后，用PBS冲洗。微波修复抗原，加过氧化物酶阻断反应，非特异性动物血清封闭，再分别滴加一抗［TNF-α(1∶100)、MMP-2(1∶100)、VEGF(1∶100)］和生物素标记的二抗，室温下孵育10 min后PBS冲洗。加链霉素菌抗生物素蛋白—过氧化物酶，室温下孵育10 min，PBS冲洗，DAB显色，苏木素复染，中性树脂封片，光学显微镜下观察。……