粪便标本中SFRP1和WIF-1基因启动子甲基化在大肠癌早期筛查中的意义

张 虎，张 平，江 军，李素迎，袁 林，齐 健，朱尤庆

(1武警湖北省总队医院，武汉430060;2武汉大学中南医院;3湖北省肠病医学临床研究中心、湖北省肠病重点实验室)

大肠癌(CRC)是胃肠道常见的恶性肿瘤，早期发现、早期诊断是降低CRC发病率、提高生存率的有效手段。目前常见的CRC筛查方式包括粪便潜血试验、电子结肠镜、仿真结肠镜检查等，这些检查存在敏感性和特异性低、需要严格的肠道准备导致患者依从性差、对早期CRC的检出率低等缺陷。表观遗传调控机制是一种可遗传的基因功能调控方式，DNA异常甲基化的改变是表观遗传修饰的主要方式之一。我们的前期研究显示，SFRP家族基因启动子甲基化在早期CRC组织中具有高频甲基化。

本研究通过检测CRC和大肠良性病变患者粪便标本中SFRP1和WIF-1基因启动子的甲基化状况，探讨二者作为CRC筛选标志物的可行性。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择2012年3月～2013年3月武汉大学中南医院住院患者145例，其中CRC 48例，男24例、女24例，年龄19～86岁、平均61.1岁;大肠腺瘤35例，男23例、女12例，年龄25～74岁、平均56.3岁;大肠增生性息肉32例，男17例、女15例，年龄31～79岁、平均54.4岁。均经术后病理或内镜活检病理证实。入选标准:无家族CRC及大肠息肉病史;收集粪便前5 d内未进行结肠镜检查、灌肠等侵入性操作;CRC患者未行术前放化疗。另选择30例性别、年龄匹配的健康人作为对照组，全结肠镜检查均为阴性。

1.2 方法

1.2.1 粪便样本采集 收集受试者术前或肠镜检查前自然排出的新鲜粪便样本，－80℃保存待测。

1.2.2 DNA提取 称取 200 mg粪便，使用QIAamp粪便DNA提取试剂盒(Qiagen公司，德国)提取DNA。……