■张 娟 刘 丽 高 侃 何阳春 王永侠 汪海峰
(浙江农林大学动物科技学院,浙江临安311300)
近年来,工业上对天然聚合物的需求引起人们对多糖越来越多的关注,尤其是植物多糖和微生物来源的多糖。细菌胞外多糖(Exopolysaccharide,EPS)是细菌在生长代谢过程中分泌到周围环境中的一类高分子的长链聚合物。许多细菌都能产生胞外多糖,乳酸菌为主要的益生菌,其所产生的胞外多糖对健康无任何毒副作用,是食品级多糖的来源。细菌多糖由于它们独特的功能作用,具有作为新的绿色饲料添加剂开发应用的广阔前景。乳酸杆菌EPS在发酵乳的流变学特性、产品的结构和质地以及口感等方面起重要作用外,还具有抗肿瘤、抗氧化、降低胆固醇、增强免疫力等多种生理功能。鼠李糖乳酸杆菌(Lactobacillus rhamnosus GG,LGG)能够定植于肠道,起到抑制病原菌的生长、调节肠道菌群、抗病毒、预防和治疗腹泻、提高免疫力等作用。然而目前乳酸杆菌EPS的产量不高,提取成本高,制约着其进一步生产应用。本文系统的对鼠李糖乳酸杆菌EPS的提取条件和合成条件进行了优化,旨在提高EPS的产量,为进一步分离纯化、研究其活性及应用于生产奠定基础。
鼠李糖乳酸杆菌Lactobacillus rhamnosus GG(美国乔治亚大学馈赠)、乳酸杆菌选择性培养基(MRS肉汤培养基)。
苯酚-硫酸法,以葡萄糖作为标准。
LGG在MRS肉汤中过夜培养→将过夜培养的LGG接种到新鲜MRS肉汤中培养→离心(12 000 g,10 min,4℃)除菌体和凝结蛋白→上清液中加三……