大孔树脂纯化血管紧张素酶抑制肽VLPVPR的工艺优化

李 艳，孙海燕，周丽珍，刘 冬

（深圳职业技术学院，深圳市发酵精制检测系统重点实验室，广东深圳518055）

大孔树脂纯化血管紧张素酶抑制肽VLPVPR的工艺优化

李 艳，孙海燕，周丽珍，刘 冬*

（深圳职业技术学院，深圳市发酵精制检测系统重点实验室，广东深圳518055）

考察大孔树脂（AB8，D101，DM130，HPD100B，HPD826）对血管紧张素酶抑制肽VLPVPR的吸附性能及纯化效果，确立纯化VLPVPR的较优工艺。结果表明，HPD100B最适于VLPVPR的纯化。最优纯化工艺为：温度20℃，pH9.8，上样流速为3mL/（cm2·min），上样量达到180mL，洗脱液乙醇溶液浓度为60%，洗脱流速为0.25mL/（cm2·min），洗脱体积为45mL。此条件下，VLPVPR的解吸率达93.1%，纯度为28.8%，血管紧张素酶抑制率IC50为4.1μmol/L。

血管紧张素酶抑制剂，VLPVPR，大孔树脂，纯化

血管紧张素酶抑制肽是一类能通过抑制血管紧张素转化酶活性从而达到降低血压的小分子多肽，其主要来源于天然动植物及微生物蛋白质，具有降压效果明显、无毒副作用等特点[1-4]。目前，日本是血管紧张素酶抑制肽研究最多的国家，主要从乳清蛋白及鱼类蛋白中提取。我国起步较晚，吴建平等[5]在对大豆降血压肽的研究及酶系选择和参数优化方面做了许多研究。

VLPVPR（Val-Leu-Pro-Val-Pro-Arg）[6]是通过构建的基因工程菌E.coli BL21（pGEX-4T-2-AHP），重组的6拷贝串联肽以融合蛋白GST-AHP形式由乳糖诱导表达，采用胰蛋白酶水解GST-AHP得到的血管紧张素酶抑制肽单体。肽分离的一般思路是先去除分子量较大、不水解的蛋白质，再根据分子量大小，采用凝胶过滤分离得到目的短肽。如果ACE抑制肽结构相近，则需根据电荷、分子极性差异等性质结合离子交换层析、疏水层析和RP-HPLC等其他分离方法来达到分离目的。……