稳定同位素稀释超高效液相色谱串联质谱法测定饲料中24种禁用兽药含量

周鹏　林钦　黄红霞等

摘 要 建立了同时定性与定量分析动物饲料种24中禁用药物的超高效液相色谱串联质谱（UHPLCMS/MS）分析方法。样品经Na2HPO4与饱和NaCl溶液共同盐析， 乙腈提取，混合阳离子交换固相萃取柱（PCX）净化，乙腈和0.3%甲酸溶液梯度洗脱，经BEH C18色谱柱分离，串联四级杆质谱动态多反应监测正离子模式监测，稳定同位素标记内标法定量。在最佳实验条件下，24种禁用兽药在各自的线性范围内线性关系良好，相关系数（r）均大于0.9960，检出限为1.0 μg/kg，定量限为2.0 μg/kg，加标回收率在77%～115%之间，相对标准偏差小于10%。本方法的样品前处理过程简单，净化效果好，有效解决了基质效应问题，灵敏度高，适用于各种饲料中多组分禁用兽药的快速定性与定量分析。

关键词 超高效液相色谱串联质谱； 稳定同位素内标； 动态多反应监测； 禁用兽药； 饲料

1 引 言

兽药在养殖业发展中具有举足轻重的作用，但是由于养殖环境以及养殖水平不佳，或者为了提高饲料转化率，出现滥用兽药的现象。农业部分别于2002年和2010年发布176号公告 [1 ]、193号公告 [2 ]和1519号公告 [3 ]，向社会公布了禁用药物清单，包括肾上腺素受体激动剂、β1受体阻断药、抗组胺药、抗高血压药等药物。这些药物多会通过食物链传导，给人类带来巨大危害。

近年来，科研人员针对不同种类药物，研发出多种分析方法，主要包括基因芯片法 [4 ]、毛细管电泳法 [5 ]、气相色谱质谱联用法 [6，7 ]、液相色谱质谱联用法 [8，9 ]、高效液相色谱法 [10，11 ]、酶联免疫法 [12 ]等。然而现有方法存在分析目标物种类单一、部分化合物还未发现检测方法，对预混料等复杂基质样品回收率较差等问题，不利于复杂样本的大规模筛查。……