重组抗人表皮生长因子受体（EGFR）嵌合单克隆抗体CH225非还原电泳纯度分析

付换成卢秋丽刘浩张文秋赵云

重组抗人表皮生长因子受体（EGFR）嵌合单克隆抗体CH225非还原电泳纯度分析

付换成①卢秋丽①刘浩②张文秋③赵云①

目的：分析CH225在非还原电泳时抗体条带主条带以外在高分子量和低分子量产生杂条带的原因。方法：在不同的供试品缓冲液和不同电泳条件下进行SDS-PAGE电泳比较。结果：上样前100 ℃煮样1 min与加碘乙酰胺结果相同。结论：高分子量和低分子量杂条带可以用电泳上样前100 ℃煮样1 min消除即可。

非还原SDS-PAGE； 重组单抗； EGFR； 重组抗人表皮生长因子受体

药品生产过程中，重组蛋白类药物的质量检测和控制十分重要，SDS-PAGE（聚丙烯酰胺凝胶电泳）是蛋白类药物的纯度分析的常用手段[1-2]。CH225（重组抗人表皮生长因子受体（EGFR）嵌合单克隆抗体）是四川恒星生物制药有限公司采用基因工程技术，利用NS/0细胞表达的人源化抗体，属于IgG1亚型，已用于转移性结直肠癌、头颈癌等多种癌症的治疗，并且现有研究表明可能适用于鼻咽癌、肺癌等其他癌症的治疗[3-4]。在CH225的临床前研发，质量检测的过程中发现，除抗体主条带以外，还存在一些分子量大小不同的杂条带，特别在非还原性实验中，情况尤为明显。本文采用不同温度和不同试剂的条件下对样品进行预处理，比较最佳的SDS-PAGE结果，为CH225批量生产的质量检测和控制提供参考和依据。

1 材料与方法

1.1 药品 参比品（批号C201105002）：四川恒星生物制药有限公司于2011年5月第2批生产的CH225注射液；对照品（批号C201107006）：四川恒星生物制药有限公司于2011年7月第6批生产的CH225注射液；……