益母草水提物对子宫收缩活动的影响

李丹，谢晓芳，彭成，熊亮，赵小梅

·药理毒理·

益母草水提物对子宫收缩活动的影响

李丹，谢晓芳，彭成，熊亮，赵小梅

目的：益母草水提物对大鼠离体子宫平滑肌收缩功能的影响。方法：实验前两日雌性未孕大鼠每日肌肉注射苯甲酸雌二醇1 mg．kg-1，于第3日颈椎脱臼处死动物，迅速剖取子宫，用BL-420E生物机能系统记录子宫收缩曲线；加入水提物药液20、20、40 μL，采用累加给药方式，每次给药后记录10 min收缩曲线，比较给药前后收缩张力、频率和活动力的变化。结果：益母草水提物对未孕大鼠子宫均具有促进收缩作用，使子宫活动力、收缩张力均值和最小值均明显增加（P＜0.05或P＜0.01），且呈一定量效关系；同时，水提物可抑制缩宫素对子宫的收缩作用，使子宫活动力、收缩张力的均值和最大值均显著降低（P＜0.05或P＜0.01）。结论：益母草水提物对子宫活动具有双向调节作用，对未孕大鼠正常子宫具有兴奋作用，对痉挛子宫具有舒张作用。

]益母草；离体子宫；双向调节

益母草为唇形科植物益母草（Leonurus japonicus Houtt.）的新鲜或干燥地上部分，性味苦、辛、微寒，归肝、心包、膀胱经。功效活血调经，利尿消肿，清热解毒，用于治疗月经不调，恶露不尽，水肿尿少，疮疡肿毒等[1]。本实验采用离体子宫模型观察益母草水提物对未孕大鼠离体子宫收缩活动的影响。

1 实验材料

1.1 提取物制备

取益母草药材500 g，加水煎煮2次，每次1 h，合并水煎液，滤过，滤液浓缩得到浸膏为水提物（W2），每g相当于6 g生药，按生药量用蒸馏水配成0.6 g．mL-1，备用。

1.2 实验动物

SD大鼠，普通级，全雌，体重180～220g，由成都中医药大学实验动物研究中心提供，质量合格证号：SCXK（川）2008-11，检疫后用。

1.3 主要试剂及仪器

缩宫素注射液（河南辅仁怀庆堂制药有限公司，批号1204021，用蒸馏水配成1U．mL-1，备用）；苯甲酸雌二醇注射液（天津金耀氨基酸有限公司，批号1005051）。NaCl、KC1、CaCl2、NaHCO3、无水葡萄糖试剂，均由成都市科龙化工试剂公司生产，采用去离子水配置洛氏液（配置方法：1000 mL含NaCl 9.2 g、KC1 0.42 g、CaCl20.24 g、NaHCO30.15 g、无水葡萄糖1.0 g)。BL-420E生物机能系统，JH-2型张力换能器，HW-400E型恒温水浴平滑肌槽，均由成都泰盟科技有限公司生产。

2 实验方法

2.1 离体子宫的制备[2]

取健康、成年雌性未孕大鼠，实验前2日每日肌肉注射苯甲酸雌二醇1 mg．kg-1以造成动情期。于第3日颈椎脱臼处死动物，迅速剪开腹腔剖取子宫置于盛有洛氏液的玻璃皿中，轻轻剥离子宫上附有的结缔组织和脂肪组织。取子宫中间段2～3cm，一端固定于盛有洛氏液20 mL的浴槽，另一端连接张力换能器，浴槽中营养液保持（37±0.5）℃，并通以（95% O2+5% CO2）的混合气体，速度1～2个小气泡/s，前负荷1 g。用BL-420E生物机能系统记录子宫收缩曲线。

2.2 给药方法

待曲线稳定30 min，采用累积加药方式给药，加入提取物W2药液，采用累加给药方式（W2剂量为20、20、40 μL，终浓度相当于生药量0.0006、0.0012、0.0024 g．mL-1），每次加药后记录10 min离体子宫收缩活动，三次加完后用洛氏液冲洗3次，再加入等量的洛氏液，待曲线稳定后，用同样的加药方式加入下一组药物；加入1 U．mL-1缩宫素160 μL，记录曲线10 min后再加入高剂量的药液记录10 min，观察离体子宫肌收缩活动的变化。

2.3 统计学方法

用SPSS 17.0统计软件进行配对t检验统计分析给药前后的变化，以（±s）表示，P ＜ 0.05 为显著性差异，P＜0.01为极显著性差异。

3 实验结果

3.1 对未加缩宫素子宫活动的影响

与给药前相比，益母草水提物中、高剂量使子宫活动力、收缩张力均值和最小值均明显增加（P＜0.05或P＜0.01），低剂量对子宫无明显作用。由此可见，益母草水提物具有兴奋正常子宫平滑肌活动的作用。结果见表1，图1。

表1 益母草药材不同部位对正常大鼠离体子宫收缩活动的影响（±s）

表1 益母草药材不同部位对正常大鼠离体子宫收缩活动的影响（±s）

注：与给药前比较，*P＜0.05，**P＜0.01

组别 指标 N 给药前 低剂量 中剂量 高剂量空白组 活力 10 1682.90±358.30 1653.70±271.38 1702.50±284.26 1710.10±233.53水提物 8 1245.00±195.78 1314.25±215.61 1327.25±180.60* 1361.88±195.19**空白组 频率 10 7.20±1.93 7.10±1.79 7.20±1.87 6.80±1.40水提物 8 7.88±3.00 7.00±3.02 7.63±2.97 7.63±2.67空白组 平均值 10 2.80±0.59 2.75±0.45 2.83±0.47 2.85±0.39水提物 8 2.07±0.32 2.18±0.36 2.21±0.30* 2.30±0.32**空白组 最大值 10 5.71±0.80 5.40±1.28 5.72±0.77 5.74±0.71水提物 8 4.52±1.51 4.37±1.50 4.22±1.33 4.08±1.31空白组 最小值 10 1.66±0.37 1.67±0.34 1.68±0.36 1.69±0.37水提物 8 1.43±0.16 1.56±0.27 1.63±0.24* 1.70±0.26**

图1 益母草水提物对大鼠子宫收缩的影响（从左到右依次为给药前、低剂量、中剂量、高剂量）

3.2 对缩宫素所致子宫痉挛的影响

与造模前比较，给予缩宫素后大鼠离体子宫平滑肌条强烈收缩，活动力明显增加，收缩张力均值和最小值明显升高，差异有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）。给予益母草水提物后，使子宫活动力和收缩张力的均值、最大值降低，表现为抑制缩宫素对子宫的兴奋作用。结果详见表2，图2。

表2 益母草药材不同部位对给予缩宫素后大鼠离体子宫收缩活动的影响（±s）

表2 益母草药材不同部位对给予缩宫素后大鼠离体子宫收缩活动的影响（±s）

注：与造模前比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与造模后比较，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01

组别 指标 N 造模前 造模后 给药后空白组 活力 10 1668.75±320.07 2714.88±411.84** 2661.38±421.18水提物 8 1351.00±261.41 2082.38±695.25** 1744.38±535.32▲▲空白组 频率 10 8.00±2.51 8.13±4.09 9.13±3.76水提物 8 5.25±1.58 5.00±3.89 5.00±3.70空白组 平均值 10 2.78±0.53 4.52±0.69** 4.43±0.70水提物 8 2.24±0.43 3.46±1.16** 2.90±0.89▲▲空白组 最大值 10 5.66±0.97 5.94±0.52 5.80±0.59水提物 8 4.55±1.22 4.69±1.48 4.17±1.46▲空白组 最小值 10 1.69±0.33 2.00±0.35* 2.88±0.74▲▲水提物 8 1.54±0.38 2.03±0.69* 2.07±0.61

图2 益母草水提物对缩宫素所致痉挛子宫收缩的影响

4 讨论

现代研究表明，益母草药理作用相当广泛，其对子宫有双向调节作用，即当子宫在正常状态下用药引起子宫兴奋收缩，而当子宫在痉挛状态时用药则引起松弛[3]。

试验结果显示，益母草水提物具有一定兴奋大鼠离体子宫平滑肌的作用，使子宫活动力、收缩张力均值和最小值均明显增加，并呈一定的量效关系。益母草水提物能对抗缩宫素致子宫兴奋，使子宫活动力和收缩张力的均值、最大值降低。

据本试验结果可知，益母草水提物对子宫具有收缩和兴奋作用，这种双向作用可能是由于子宫不同生理状态所致，也可能是其所含不同成分所致，机制有待在今后的研究中探讨。

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典一部[S].北京:中国医药科技出版社,2010:272.

[2] 徐叔云,陈修,卞如濂.药理实验方法学•第三版[M]. 北京:人民卫生出版社, 2002: 1582.

[3] 李凤娟.浅析妇产科中的益母草应用[J].中医临床研究, 2012, 4(8):53.

（责任编辑：陈思敏）

Effect of aqueous extract of Yimucao on isolated smooth muscle of uterus

/LI Dan, XIE Xiao-fang, PENG Cheng, XIONGLiang, ZHAO Xiao-mei//(Pharmacy College, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine; The Ministry of Education Key Laboratory of Standardization of Chinese Herbal Medicine; State Key Laboratory Breeding Base of Systematic Research, Development and Utilization of Chinese Medicine Resources Co-founded by Sichuan Province and MOST, Chengdu 611137, China)

Objective: To investigate the effect of aqueous extract of Yimucao on uterine smooth muscle of vitro. Method: The effect of aqueous extract decoction on the spontaneous activity of uterine smooth muscle was observed with BL-420E biological signaling system and the activity of isolated uterus smooth muscle was recorded. The doses of the aqueous extract were 20, 20, 40 μL using cumulative mode of administration. The indexes included the amplitude，frequency and mobility in rat’s uterine smooth muscle movement track. Result: The aqueous extract had an effect on unpregnant rat uterus, and the activity, average and minimum values were signifcantly increased (P ＜ 0.05 or P ＜ 0.01). It can inhibit oxytocin effect on the contraction of the uterus, which could signifcantly decrease uterine activity and the average and maximum values of tension (P ＜ 0.05 or P ＜ 0.01). Conclusion: Yimucao has two-way adjustment function on uterine activity. It stimulates the normal uterus of rats and inhibits the convulsive uterus.

Yimucao；isolated uterus；two-way adjustment function

R 285.5

A

1674-926X(2014)02-019-03

国家“十二五”重点科技支撑计划项目（2009BAI84B00）

成都中医药大学药学院 中药材标准化教育部重点实验室 中药资源系统研究与开发利用省部共建国家重点实验室培育基地，四川 成都 611137

李丹，在读硕士研究生，主要从事中药复方药理毒理研究

Tel:13558661832 Email:fdqlidan@163.com

彭成，教授，博士生导师，主要从事中药复方药理与疾病动物模型研究 Tel:028-61800018

Email:pengchengchengdu@126.com

2013-07-04