伯乐质控品复溶后在Sysmex CA7000凝血仪上稳定性的研究

王秋菊，肖辉建，吴 双，凌月明

伯乐质控品复溶后在Sysmex CA7000凝血仪上稳定性的研究

王秋菊，肖辉建，吴 双，凌月明

目的：通过凝血酶原时间（prothrombin time，PT）、部分凝血活酶时间（activated partial thromboplastin time，APTT）、凝血酶时间（thrombin time，TT）、纤维蛋白原（fibrinogen，FIB）的伯乐质控品在冷冻保存不同时间后复溶的检测结果，研究伯乐质控品复溶后-30℃冷冻保存对其在Sysmex CA7000凝血仪上检测的稳定性影响。方法：取3瓶干粉状凝血质控品复溶后分装于14支具盖离心管中，留1支当天检测，其余13支-30℃冷冻保存，每天各取1支，快速复溶后随标本一起进行质控测试，测定结果导入伯乐质控软件中。结果：伯乐凝血质控品复溶后PT、APTT、TT、FIB结果的日间CV值均小于5%，分装后第2～14天的测定结果与开瓶当日的测定结果间差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论：伯乐凝血质控品复溶后-30℃冷冻保存14 d内，在Sysmex CA7000血凝仪上的检测结果具有良好的稳定性。

伯乐质控品；Sysmex CA7000凝血仪；冷冻保存；稳定性

0 引言

凝血结果的可靠性直接影响临床对血液凝固功能的判断，而室内质量控制是保证测定结果精密性和准确性的关键，能够满足为临床判断提供稳定可靠的实验数据的基本要求。室内质控的目的是检测分析过程中的误差，控制与分析有关的各个环节，保证检测结果的可靠准确。质控品的稳定性是质量控制过程中的重要一环，质控物就是质量控制的物质基础，所以在凝血质控品的选择上，准确性、稳定性及有效性是首先考虑的，近年来，伯乐凝血质控品以良好的稳定性和有效期长等优点备受关注。伯乐凝血干粉质控品复溶后按其规定的条件放置于2～8℃下保存，但发现质控检测的结果并不是很稳定，且有效期较短，复溶后只能在2～8℃下保存48 h，有的甚至导致失控，不是很稳定，给实验室带来较大的成本压力。考虑如果质控液复溶分装后在冷冻条件下能够较长时间保持稳定，可解决反复冻融带来的不准确性问题，使稳定性明显提高，也可以大幅减少实验室检测成本的支出。为此，对伯乐凝血质控品复溶后分装放置于-30℃冷冻保存下解冻后在 Sysmex CA7000血凝仪上检测结果的稳定性进行研究，通过观察其稳定性，可避免失控时对仪器稳定性状况的错误判定。

1 材料与方法

1.1 仪器及试剂

全自动血凝分析仪Sysmex CA7000；低温保存箱为海尔DW-40L508；测定所用试剂均为德国Dade Behring Marburg公司提供；质控品为美国伯乐公司的干粉质控品，批号为78201、78202。

1.2 方法

1.2.1 质控均值的测定

操作者在仪器每天处于良好的运行状态时，按照《CNAS-CL43医学实验室质量和能力认可准则》在临床血液学检验领域的应用说明要求，将质控品连续检测20 d，得到20个质控项目凝血酶原时间（prothrombin time，PT）、部分凝血活酶时间（activated partial thromboplastin time，APTT）、凝血酶时间（thrombin time，TT）、纤维蛋白原（fibrinogen，FIB）的测定值，导入伯乐质控软件中，计算出其变异系数（CV）和测量均值（X），并以此作为质控均值。

1.2.2 质控品复溶后不同保存时间的测定

取3瓶伯乐干粉凝血质控品，各加无菌注射用水1 mL复溶，该过程严格按照本实验室复溶标准操作规程操作，将其中2瓶质控液倒入另一瓶质控液中，充分混匀消除瓶间差后分装成14支，每支200μL。取1支当天在CA7000血凝仪上测定，另13支放入-30℃冰箱冷冻保存。之后每天取1支冷冻分装质控品常温下复溶，完全解冻后与常规标本一起进行检测，连续测定14 d。按该方法操作5次。

1.3 统计学处理

将每天的质控结果分别进行统计，并导入到伯乐质控软件程序中。使用SPSS13.0和Excel 2003统计软件进行数据分析，多组间的比较用单因素方差分析，组间均数比较用t检验，以P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 不同保存时间内所测质控结果

伯乐凝血质控品复溶后不同保存时间内PT、APTT、TT、FIB测定的±s和CV值见表1。

表1 凝血质控品溶解分装后在-30℃下不同保存时间的稳定性比较

2.2 检测结果比较

由表1可知，不同保存时间内PT、APTT、TT、FIB两水平所测结果相对比较稳定，且比较方差分析显示不同保存时间测定结果之间差异无统计学意义（P＞0.05）；t检验显示冷冻分装后第2～14天的PT、APTT、TT、FIB检测结果与第1天的检测结果差异均无统计学意义（P＞0.05）。

3 讨论

Sysmex CA7000凝血仪是检验科常见的凝血仪器，其具有精密度好、准确性高、分析检测范围宽、检测限低、样本间及试剂间携带污染率低的特点，已有文献证实[1]，它是检测结果准确性必备的基础条件。本仪器对PT、APTT、TT的测定采用光学法，即PT是在体外模拟人体内外源性凝血的全部条件，测定血浆凝固所需的时间，用以反映外源性凝血途径和共同凝血途径凝血因子是否异常，是筛检凝血功能最基本的试验之一；APTT是在外界环境下模拟人体内内源性凝血所需的条件，测定血浆凝固所需的时间，用以反映内源凝血因子是否异常，是筛检止凝血功能最常用的试验之一；TT是在纤维蛋白原逐渐变成纤维蛋白时，入射光发生散射，测定散射光或透射光发生变化，从而测定血浆凝固时间；SysmexCA7000凝血仪对FIB的检测采用Clauss法，即在被检血浆中加入凝血酶，从国际标准品FIB参照血浆测定的标准曲线中可获得被检血浆的FIB实际含量[2]。采用全自动仪器法检测，操作简便、检测快速、准确性高，且仪器可连续记录凝血过程中光、电或机械运动的变化，试剂、校准品、质控品均是配套来源，保证了实验高精度。

《临床实验室管理办法》要求对有质控品供应的检验项目及各级临床检验中心开展室间质量评价的检验项目必须进行室内质量控制。室内质量控制是保证临床实验室检验质量最重要的环节。质控品是质控的物质基础，质控品的稳定性是日常室内质量评价的必要条件[3]。所以，日常在使用Sysmex CA7000凝血仪检测前，除了需要保证仪器处于良好稳定的状态下，还需要有良好稳定性的质控品进行室内质量评价。

而质控品保存复溶环节对其稳定性有直接的影响，如质控品中凝血因子的稳定性较差，可评价该种凝血质控品质量较差。有文献报道，凝血因子在室温下的稳定性较差，其保存时间与保存温度有关[4-5]，常温下样品应在2 h内完成测定，若常温下不能及时检测，应置于低温下保存。本科室选择伯乐凝血质控品对Sysmex CA7000凝血仪日常检测前进行室内质量评价。考虑干粉质控品在复溶时瓶间差较大[6]，本方法试采用一次性溶解3瓶同一批号冻干质控品混合后分装低温冷冻保存的方法，以降低该因素影响；并将溶解后的质控品在-30℃下分装冷冻保存14 d复融后检测，以消除反复冻融后的误差。

以上数据显示，凝血质控品溶解分装后在-30℃下不同保存时间的PT、APTT、FIB 3个检测项目日间CV值均小于5%，符合CLIA′88规定的可接受范围；因CLIA′88对TT项目的总误差（TEa）没有具体

（▶▶▶▶）（◀◀◀◀）要求，笔者按PT及APTT项目的要求设定TT的TEa为15%，所以TT项目符合要求，说明Sysmex CA7000血凝仪在检测伯乐质控品PT、APTT、TT、FIB 4个项目的稳定性较好。置于-30℃下不同保存时间PT、APTT、TT、FIB测定结果之间差异无统计学意义，冷冻分装后第2～14天的测定结果与第1天的测定结果间差异均无统计学意义，表明复溶后分装放置在-30℃冷冻条件下保存14 d内能够保持良好的稳定性。Sysmex CA7000血凝仪在使用伯乐凝血质控品时，可应用该方法，以减小室内质控测试项目的不精密度，满足日常Sysmex CA7000血凝仪室内质控工作的需要。综上所述，一次性溶解数瓶干粉质控品混匀后分装保存于-30℃下、用时复溶的质控品具有质控血清特性，可降低干粉质控品瓶间差导致的不准确性，保证检测结果的稳定性、有效性及即时性，可降低实验室成本，避免浪费检测时间，并能够迅速把准确可靠的检验结果提供给临床医师，让其对病患作出正确的诊断和治疗。该方法不仅能保证质量，而且可节约成本，使用方便，值得在中小型实验室进行推广。

[1]冯厚梅，孙德华，郑磊.Sysmex CA7000全自动凝血仪性能评价[J].检验医学，2011，26（1）：58-62.

[2]熊立凡，刘成玉.临床检验基础[M].4版.北京：人民卫生出版社，2008：70-76.

[3] 武建国，顾可梁，童明庆，等.医学实验诊断学进展[M].南京：东南大学出版社，2000：29-35.

[4]Salvagno G I，Lippi G，Montagnana M，et al.Influence of temperature and time before centrifugation of specimens for routine coagulation testing[J].Int J Lab Hematol，2009，31（4）：462-467.

[5]李曼辉，杨宇勤，姚元超.健康者混合血浆制备凝血质控物及其稳定性的探讨[J].国际检验医学杂志，2011，32（7）：809-810.

[6]林增文，邹伟民，卓绮玲，等.DATE冻干质控血清瓶间差及复溶后稳定性测定[J].陕西医学检验，2000，15（4）：50-51.

（收稿：2013-10-13 修回：2014-05-08）

（栏目责任编校：李 影 傅 雳）

Post-redissolution stability research on Bio-Rad coagulation quality control materials by Sysmex CA7000 coagulation system

WANG Qiu-ju,XIAO Hui-jian,WU Shuang,LING Yue-ming
(Department of Clinical Laboratory,the 180th Hospital of the PLA,Quanzhou 362000,Fujian Province,China)

ObjectiveTo explore the effects of Bio-Rad coagulation quality control materials with different storage time by detecting prothrombin time (PT),activated partial thromboplastin time (APTT),thrombin time (TT)and fibrinogen (FIB),and to study its post-resolution stability on Sysmex CA7000 coagulation system after-30℃ cryopreservation. MethodsTotally 3 bottles of powder quality control materials redissolved and then loaded into 14 centrifuge tubes with covers,and 1 tube was tested on the day.The remained 13 tubes were reserved at-30℃,and then redissolved for quality control test one by one in 13 days.The test results were introduced into Bio-Rad quality control software.ResultsThe daytime CV values for PT,APTT,TT and FIB were all less than 5%,and there was no statistical difference between the results on the day and the ones on 2 to 14 days after loading (P＞0.05).ConclusionSysmex CA7000 coagulation system proves that Bio-Rad coagulation quality control materials has high post-redissolution stability after 14-day-30℃ cryopreservation.[Chinese Medical Equipment Journal，2014，35（11）：98-99，108]

Bio-Rad coagulation quality control material;CA7000 coagulation system;cryopreservation;stability

R318.6；TH776

A

1003-8868（2014）11-0098-03

10.7687/J.ISSN1003-8868.2014.11.098

王秋菊（1986—），女，检验师，主要从事临床检验方面的研究工作。

362000福建泉州，解放军180医院检验科（王秋菊，肖辉建，吴双，凌月明）