GRIM-19在H2O2诱导的晶状体上皮细胞氧化应激中的表达

2014-03-21 06:28:10刘加勇王思敏林婷婷冯浩宁宏
中国医科大学学报 2014年4期
关键词:氧化应激检测

刘加勇,王思敏,林婷婷,冯浩,宁宏

(中国医科大学附属第一医院眼科,沈阳110001)

GRIM-19在H2O2诱导的晶状体上皮细胞氧化应激中的表达

刘加勇,王思敏,林婷婷,冯浩,宁宏

(中国医科大学附属第一医院眼科,沈阳110001)

目的观察干扰素/维甲酸联合应用诱导细胞凋亡相关基因19(GRIM-19)在不同浓度H2O2诱导的人晶状体上皮细胞(HLEC)氧化应激中的表达变化。方法免疫荧光法检测GRIM-19在正常HLEC中的表达及定位;建立HLEC氧化损伤模型:分别用浓度为0、20、100、300、400和800 μmol/L的H2O2处理HLEC 1 h后换液,继续孵育6、24 h;MTT法检测各浓度H2O2对HLEC的生长抑制作用;Western blot法检测6 h组HLEC中GRIM-19表达的变化。结果免疫荧光结果示:GRIM-19主要表达于HLEC细胞质中;MTT结果示:100~800 μmol/L H2O2对HLEC有增殖抑制作用,且呈剂量依赖关系,与对照组相比差异有统计学意义(P均<0.01),20 μmol/L组与空白对照组未见明显差异(P>0.04);Western blot结果显示:GRIM-19在各浓度组中相对表达量分别为1.466±0.018,1.409±0.038,1.499±0.014,1.709±0.048,1.813±0.010,1.483±0.021,实验组均显著高于空白对照组,正常对照组与空白对照组未见明显差异(P<0.04)。结论正常HLEC中存在GRIM-19表达。在一定浓度H2O2诱导的氧化应激中,GRIM-19的表达显著增加。

GRIM-19;H2O2;人晶状体上皮细胞;氧化应激

白内障的发生、发展与晶状体上皮细胞氧化损伤有关[1]。氧化损伤是导致晶状体上皮细胞发生凋亡的重要因素之一。研究表明,晶状体上皮细胞的凋亡是除先天性白内障以外所有类型白内障的共同细胞学基础[2]。多种调控基因参与了晶状体上皮细胞凋亡。干扰素/维甲酸联合应用诱导细胞凋亡相关基因(genes associated with retinoid interferon induced mortality,GRIM)19是最近发现的一组参与干扰素和维甲酸合并诱导细胞凋亡的基因群,它不仅具有启动凋亡的作用,还参与细胞线粒体的呼吸链功能。……

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