雷公藤多苷对早期糖尿病肾病大鼠肾组织单核细胞趋化蛋白1及结缔组织生长因子表达的影响

张继强　张　燕　尹晓丽　杨　萍　张海峰　郭亚玲　陈卫东

糖尿病肾病(DN)是糖尿病慢性并发症之一，研究证实炎症和免疫反应在DN进展中起重要作用[1]。单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)作为单核/巨噬细胞特异性趋化因子，可引起炎症细胞在肾组织中广泛浸润，激活炎症反应而参与DN发生发展[2]。结缔组织生长因子(CTGF)作为转化生长因子β的下游效应因子，在刺激系膜细胞增生和细胞外基质(ECM)合成、促肾脏纤维化方面发挥作用，可诱导系膜细胞产生与DN相关的病理改变[3]。雷公藤多苷(TG)因具有独特的抗炎及免疫抑制作用而被应用于DN临床治疗，但至今对其具体作用机制的研究仍较少。本研究即通过观察早期DN大鼠肾组织CTGF及MCP-1表达情况及不同剂量TG对其的影响，探讨两者在DN发病中的作用机制，同时观察TG的作用机制及不同剂量TG对DN的治疗效果。

材料与方法

药物及试剂雷公藤多苷片购自上海复旦复华，链脲佐菌素(STZ)购自美国Sigma；兔抗大鼠CTGF、MCP-1一抗、小鼠抗大鼠单核巨噬细胞抗原(ED-1)单克隆抗体、生物标记山羊抗兔及小鼠IgG及DAB显色剂盒等购自北京奥博森；Trizol及RT-PCR试剂盒分别购自美国Invitrogen及fermentas公司，CTGF、MCP-1及β-actin引物合成于上海生工。

实验动物清洁级8周龄雄性SD大鼠共32只，体重180～200g，购自蚌埠医学院实验动物中心。

动物模型制备、分组及治疗大鼠按数字随机法分正常对照(NC)组、糖尿病肾病(DN)组、小剂量TG干预(TG1)组及双倍剂量TG干预(TG2)组各8只。造模组予以高糖高脂饲料(普通饲料+10%猪油+20%蔗糖+3%胆固醇)喂养4周后，予STZ 55 mg/kg一次性腹腔注射；……