牡荆素与DNA相互作用的机理研究

刘 炜，刘 红

（海南师范大学化学与化工学院，海口571158）

DNA与药物分子相互作用的研究有助于了解药物的作用机理，并更有效地指导新药设计，以DNA作为药物作用靶是有效的新兴的药物筛选和新药设计手段［1－3］.

牡荆素属于黄酮苷类化合物，存在于山楂、牡荆、竹叶等植物中，主要用于治疗心血管疾病，也是防癌抗肿瘤的天然药物成分，具有较强的抗氧化、抗癌、抗病毒的药理活性，生物活性测定中对人类癌细胞显示了广泛的细胞毒作用.本论文主要通过紫外吸收光谱法、荧光光谱法和黏度法研究牡荆素与DNA的相互作用，该研究将有助于揭示牡荆素的抗癌机理.

图1 牡荆素结构式Fig.1 The structure of vitexin

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

TU－1901紫外可见分光光度计（普析通用，北京），PHS－25型p H计（上海雷磁），日立F－4500荧光分光光度仪（日本）.

DNA贮备液：称取0.1 g的鲱鱼精DNA（Sigma公司）以二次蒸馏水定容于100 m L的容量瓶中，由在260 nm处的吸光度（ε＝6600 L·mol－1·cm－1）确定其浓度，冰箱中冷藏.

牡荆素（中检所，纯度≥99.8%）贮备液：称取一定量的牡荆素，以乙醇定容至100 mL的容量瓶中配制成浓度为10－3mol／L，置于0至4℃下保存.

缓冲溶液：用盐酸滴加到0.1 mol／L的Tris（三羟甲基氨基甲烷）中，在p H计上调成p H7.4的缓冲溶液.

1.2 实验方法

在10 m L的比色管中依次加入1 m L p H7.4的缓冲溶液、小檗碱、DNA溶液，以及不同量的牡荆素工作溶液，定容、摇匀，进行荧光光谱的测定.荧光激发波长定为358 nm，荧光发射峰位为532 nm，狭缝宽均为5 nm.

在10 m L的比色管中依次加入1 m L p H7.4的缓冲溶液、牡荆素工作溶液和不同量的DNA溶液，定容、摇匀，以试剂空白为参比，进行紫……