何清溪,马冰宇,苏 欣,程为平
(1.黑龙江中医药大学,黑龙江哈尔滨150040;2.黑龙江中医药大学附属第一医院,黑龙江哈尔滨150040)
本研究通过温针灸百会、神门穴对点燃癫痫大鼠模型进行治疗,观察探讨温针灸百会、神门穴对癫痫大鼠细胞凋亡因子P53含量变化的影响,从而阐明温针灸百会、神门穴的抗癫痫作用及对脑保护的意义,进而完善温针灸治疗癫痫的方法。
应实验要求采用成年健康雄性SD大鼠36只,体重(200±15)g。
室温(23.00 ±4.78)℃,湿度(12.30 ±4.06)%的房间。
毫针(规格32号,苏州医疗用品厂),艾条(由南阳市卧龙汉医艾绒厂提供),戊四氮(由sigma公司生产),多聚甲醛(北京益利精细化学品公司生产),BCL-2、BAX、P53免疫组化试剂(由武汉博士德生物工程有限公司生产)。
癫痫模型制备使用随机抽取30只大鼠,腹腔注射阈下剂量 PTZ(戊四氮)35.0 mg/kg,每天1次,注射20~29天时达点燃标准,注射后观察30~50 min,根据大鼠癫痫发作的行为表现,参照Racine[1]的6级评分标准:0级:无任何反应;Ⅰ级:面部抽搐及咀嚼;Ⅱ级:点头和(或)甩头;Ⅲ级:前肢阵挛,但无直立位;Ⅳ级:前肢阵挛伴伸直;Ⅴ级:前肢及全身阵挛,失去平衡,跌倒。Ⅰ至Ⅲ级为轻型发作,Ⅳ级以上为重型发作。点燃标准:大鼠连续5次腹腔注射PTZ,均表现为Ⅳ级以上发作。
其余6只按10 ml/kg腹腔注射0.9%的生理盐水。
造模成功后将大鼠随机分为6组:温针灸10天组6只,温针灸20天组6只,针刺10天组6只,针刺20天组6只,模型组6只,空白组6只。
大鼠穴位根据《实验针灸学》中大鼠常见针灸穴位定位。……