复方丹参两步释放给药系统制备工艺研究

袁 瑜， 戴 媚， 周唯兰， 谢义鹏， 李元波*， 侯世祥

（1.扬子江药业集团 四川海蓉药业有限公司， 四川 都江堰 611830； 2.四川大学 华西药学院， 四川成都610041）

复方丹参两步释放给药系统制备工艺研究

袁 瑜1， 戴 媚1， 周唯兰1， 谢义鹏1， 李元波1*， 侯世祥2

（1.扬子江药业集团 四川海蓉药业有限公司， 四川 都江堰 611830； 2.四川大学 华西药学院， 四川成都610041）

目的 根据冠心病发病时间具有时辰节律性的特点，以多剂量给药系统为基础，运用现代药剂学制药新技术和新方法， 将控释给药系统与脉冲给药系统相结合， 把复方丹参制成两步释放给药系统 （零级释放和脉冲释放）， 即分别制备复方丹参泡腾性渗透泵片和脉冲片。 方法 将氯化钠、 甘露醇 （促渗剂） 和 HPMC（阻滞剂） 制成片芯， 用醋酸纤维素 （含致孔剂） 进行包衣制成渗透泵片；将复方丹参、 乳糖、羧甲基淀粉钠、 丁二酸和微晶纤维素制成片芯，外包隔离层、溶胀层、控释层构成。结果 3批复方丹参泡腾性渗透泵片和脉冲片的释放曲线均具有高度相似性。结论 该两步释放给药系统的制备工艺具有良好的稳定性。

复方丹参；泡腾性渗透泵片；脉冲片

冠心病是严重危害人类健康的常见疾病。近年来，时辰药理学研究表明，时辰节律性是冠心病发病时的一个突出特性。复方丹参作为典型中药小复方，其处方包括丹参、三七、冰片三味药材，在临床上广泛用于治疗冠心病等心血管疾病［1］。 根据临床研究结果，复方丹参具有抗心肌缺血、缺氧［2-4］；扩 张 冠 脉，增 加 冠 脉 血 流 量［5-6］；抗 心 律失常［7-8］； 改善血液 流变性 和微循 环［9］；调 节血脂及防止动脉粥样硬化［10］和减少血小板聚集， 抑制血栓形成［11］等药理作用， 安全性好， 受到临床医生和患者的高度评价。但是，复方丹参新型给药系统的研究相对滞后，目前主要包括滴丸、片剂、口服液、气雾剂等，在剂型的设计上均未考虑冠心病发病的时辰节律性。因此，以复方丹参方的药效物质及其作用机理为基础，结合冠心病等心血管疾病的发病特性来研制新型给药系统，对于复方丹参的二次开发具有重要意义。本实验将复方丹参作为模型药物，在多剂量给药系统的基础上，结合控释给药和脉冲给药，把复方丹参制成两步释药系统（零级释放和脉冲释放）， 即先分别制备复方丹参泡腾性渗透泵片 （effervescent osmotic pump tablet，EOPT） 和脉冲片 （pulsed-released tablet，PT）， 然后将两者按一定比例混合并置于胶囊中制成控释型脉冲胶 囊。 两 步 释 放 给 药 系 统 （ Two-step release system， TSRS）充分考虑了冠心病发病时辰节律性的特点，可收到预防和治疗冠心病的最佳效果。

1 仪器与材料

1.1 实验仪器 智能溶出试验仪 （ZRS-8G， 天津大学无线电厂）； 高 效液相色谱 仪 （ 美国 Agilent HP1100， 日 本 岛 津 LC-10A）； 气 相 色 谱 仪（GC122， 上海分析仪器总厂）； 电子天平 （德国赛多利斯）； 单冲压片机 （TDP， 上海天河制药机械厂）； 小型包衣机 （BY300A， 上海市黄海药检仪器厂）； 小型片剂硬度测定仪 （上海黄埔分析仪器厂）。

1.2 药品与试剂 丹参水溶性提取物 （西安鸿生生物技术公司）， 三七总皂苷 （云南白药集团股份有限公司）， 冰片 （成都同仁堂大药房）； 复方丹参混合药粉 （ 丹参水溶性提取物-三七总皂苷-冰片，10 ∶5 ∶3）， 聚乙烯吡咯烷酮 （PVP K30） （上海市源聚生物科技有限公司）； 醋酸纤维素 （CA） （美国 伊 士 曼 ）； 甲 基 丙 烯 酸 酯 聚 合 物 （ Eudragit RS100、 RL PO） （ 德国 Röhm）； 乙 基 纤维素（EC） （10 cp）、 羧甲基纤维素 （HPMC E5） （上海卡乐康包衣技术有限公司）；硬脂酸镁 （邵阳市天堂 助 剂 化 工 有 限 公 司）； 乳 糖 （ Pharmatose® R90M， 荷兰 DMV）； 甘露醇 （ Pearlitol®R200SD，法国罗盖特）； 聚乙二醇 （PEG400） （分析纯， 天津市科密欧化学试剂开发中心）； 柠檬酸三乙酯（TEC） （ 美国 Aldrich 公司） ； 邻苯二甲酸二乙酯（DEP） （分析纯， 天津市津宇精细化工厂）； 其余试剂均为分析纯，水均为去离子水。

2 方法与结果

2.1 丹参素 （DS）、 原儿茶醛 （PA） 体外 HPLC测定方 法［12-13］Diamonsil C18色 谱 柱 （ 4.6 mm × 150 mm， 5 μm）； 流动相为 0.2 mol/L醋酸胺水溶液-甲醇 （88 ∶12）；体积流量 1.0 mL/min； 检测波长281 nm；柱温35 ℃； 进样量 10 μL。

2.2 复方丹参两步释放给药系统中丹参素 （DS）、原儿茶醛 （PA） 释放度测定 按 《中国药典》2010 年版释放度测定法 （附录 XD第一法）， 采用溶出度测定法 （附录 XC第二法） 的装置对复方丹参泡腾性渗透泵片和脉冲片进行测定。 以 200 m L去离子水 （脱气处理） 为释放介质， 转速 100 r/min， 温度为 （37 ±0.5） ℃。 在 1、 2、 4、 6、 8、10、 12 h 对复方丹参泡腾性渗透泵片取样 5 m L，同时补加同体积同温介质； 在 2、 3、 4、 5、 6、 7、8、 9、 10、 12 h 对脉冲片取样 5 m L， 并及时补加同体积同温介质。 样品经微孔滤膜 （0.8 μm） 过滤， 取续滤液 10 μL注入色谱仪， 按 “2.1” 项下色谱条件进行测定。以样品的实际含有量为100%， 计算丹参素、 原儿茶醛的累积百分释放率D（%） （N≥3）。

2.3 复方丹参两步释放给药系统处方和制备工艺

2.3.1 复方丹参泡腾性渗透泵片的处方 传统的单层渗透泵片指的是在片芯的外面包一层半透膜，膜上打有孔的控释制剂，释放介质通过半透膜逐渐渗透到片芯内部，片芯内所含的可溶于水的药物形成过饱和溶液，并在氯化钠、甘露醇等渗透活性物质产生较大的渗透压作用下从小孔中恒速释放出来［14］。 复方丹参药物和许多传统的中药复方药物一样，因方中活性成分为含有酚羟基和羧基的酚酸类和三萜皂苷类而呈弱酸性，当半透膜外的水分渗透入片芯时，活性成分与片芯内的碳酸氢钠发生反应，产生的二氧化碳气体有助于药物的充分释放，这样在渗透压和泡腾作用的共同作用下，药物能够在12 h内以零级速率比较完全释放药物， 又能减少辅料用量，提高载药量，故将该类渗透泵片称为泡腾型渗透泵控释片［15］。 综合复方丹参泡腾性渗透泵片的片芯、包衣膜处方筛选及包衣工艺参数的筛选结果， 确定片芯及包衣膜处方分别见表 1、表2。

表1 复方丹参泡腾性渗透泵片片芯处方Tab.1 Formu lation of EOPT tablet core

2.3.2 复方丹参泡腾性渗透泵片的制备工艺 将复 方 丹 参 混 合 药 粉 （ mixed powder of compound Danshen， MPCD） 与辅料过 100 目筛混匀， 置 50 ～60 ℃烘箱烘干， 加入硬脂酸镁， 混匀， 用6 mm弧形冲模直接粉末压片， 片重 120 mg。 处方量 PEG 400 与 DEP加入丙酮， 搅拌， 完全溶解后加入处方量的醋酸纤维素， 搅拌过夜， 配制为 3% （m/V）的溶液， 采用小型包衣锅包衣。 包衣锅转速 40 r/min， 包衣 液 喷 出 速 率 1 mL/min， 片床 温 度 为34 ～36 ℃。

表2 复方丹参泡腾性渗透泵片包衣液处方Tab.2 Formulation of EOPT coating solu tion

2.3.3 复方丹参脉冲片的处方 复方丹参药物成分比较复杂，仅仅依靠崩解剂来实现脉冲释药比较困难。考虑到复方丹参药物水溶性较好，利用渗透泵机理和有机酸诱导机理，能有效实现时滞后的快速释药，又具有渗透泵制剂稳定性好的优点。综合复方丹参脉冲片的片芯、包衣膜处方筛选及包衣工艺参数的筛选结果，确定片芯及包衣膜处方分别见表 3、 表 4。

表3 复方丹参脉冲片片芯处方Tab.3 Formulation of PT tablet core

2.3.4 复方丹参脉冲片的制备工艺 将复方丹参混合药粉与辅料过 100 目筛混匀， 置 50 ～60 ℃烘箱烘干，加入硬脂酸镁，混匀，用6 mm弧形冲模直接粉末压片得片芯， 片重 120 mg。 片芯外包三层衣膜， 内层为隔离层， 包衣液为 6%的 EudragitRL PO 95%乙醇溶液， 包衣锅转速 35 r/min， 包衣液喷出速率 0.6 mL/min， 片床温度为 28 ～30 ℃；中间层为溶胀层， 包衣液为 3%的 HPMC E5 70%乙醇溶液， 包衣锅转速 30 r/min， 包衣液喷出速率0.8 mL/min， 片床温度为 36 ～38 ℃； 外层为控释层， 包衣液为 6%的 Eudragit RS100 95%乙醇溶液，包 衣 锅 转 速 35 r/min， 包 衣 液 喷 出 速 率 0.8 mL/min，片床温度为 28 ～30 ℃。

表4 复方丹参脉冲片包衣液处方Tab.4 Form ulation of PT coating solution

包衣液的配制方法 将处方量的 TEC溶于一定量的 95%乙醇，搅拌， 完全溶解后加入处方量的 Eudragit RL PO， 加入少量滑石粉作抗黏剂， 搅拌过夜即得隔离层包衣液； 将处方量的 PEG 400溶于一定量的 70%乙醇， 搅拌， 完全溶解后加入处方量的 HPMC E5， 搅拌过夜即得溶胀层包衣液；将处方量的 TEC溶于一定量的 95%乙醇， 搅拌，完全溶解后加入一定比例的 Eudragit RS、 RL和 EC混合物，搅拌过夜即得控释层包衣液。

2.4 工艺验证 按 “2.3”项处方工艺分别制备 3批复方丹参泡腾性渗透泵片和脉冲片，分别测定泡腾性渗透泵片和脉冲片的体外溶出曲线，结果见图1、 图2。

由释放曲线看出，3批复方丹参泡腾性渗透泵片和脉冲片的释放曲线均具有高度相似性，说明该两步释放给药系统的制备工艺具有良好的稳定性。

图1 3 批复方丹参泡腾性渗透泵片中丹参素 （A） 和原儿茶醛 （B） 溶出曲线图Fig.1 Release Profile of DS（ A） and PA （ B） from three batches of EOPT

图2 3 批复方丹参脉冲片丹参素 （A） 和原儿茶醛 （B） 溶出曲线图Fig.2 Release Profile of DS（ A） and PA （ B） from three batches of PT

3 讨论

3.1 复方丹参两步释放给药系统的设计以多体系系统为基础，由零级释放的复方丹参泡腾性渗透泵片和脉冲释放的脉冲片按一定的比例装入硬胶囊中构成， “S” 型的释药曲线可以满足冠心病的时辰治疗，减少 “心血管事件” 的发生机率。 复方丹参泡腾性渗透泵片利用复方丹参药物呈酸性的特点，直接加入碳酸氢钠组成泡腾性活性物质，与渗透压活性物质共同作为药物释放的推动力，可以在12 h内以零级速率恒速释药。 脉冲片由含有有机酸、渗透活性物质和具有膨胀作用的崩解剂的片芯外包三层衣膜构成，这样药物在膨胀，渗透压和有机酸诱导机理的共同作用下，在一定的时滞后脉冲释药。

3.2 粉末直接压片法工序简单，在国外研究中使用较广，适用于流动性和可压性较好的原料。复方丹参泡腾性渗透泵片和脉冲片原料吸湿性较强，需控制环境湿度，添加适量的硬脂酸镁后流动性可达到粉末直接压片要求。

3.3 包衣锅温度和转速是影响包衣膜的性质的主要因素。包衣温度高于 45 ℃， 转速低于 30 r/min均会导致包衣片表面不均匀。这是因为温度高于45℃时， 包衣液中溶剂挥发过快， 使得包衣液中成膜物质析出快，不能在片芯表面均匀铺展，导致衣膜均匀性不佳。 在转速小于 30 r/min 时，由于样品滚转较慢，片芯之间或片芯与包衣锅在包衣液喷入后容易产生黏连。 将转速控制 50 r/min 以上时，片芯间不黏连，包衣膜表面光滑、均匀。此外，滚转速度越高，片芯磨损也会加大。实验过程中，由于锅内温度及风速受限，包衣液的喷入速度过高，包衣液挥发不完全，从而出现包衣片表面不均匀，包衣膜透明度不佳，韧性不足等一系列问题。因此，本实验根据包衣效果及各包衣液的性质确定最佳的包衣温度、 转速及包衣液体积流量［16］。

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PreParation Process of two-steP release drug delivery system of com Pound Danshen

YUAN Yu1， DAIMei1， ZHOUWei-lan1， XIE Yi-peng1， LIYuan-bo1*， HOU Shi-xiang2
（1.Yangtze River Pharmaceutical Group， Sichuan Hairong Pharmaceutical Co.， Ltd， Dujiangyan 611830， China； 2.West China Schoolof Pharmacy，Sichuan University， Chengdu 610041， China）

compound Danshen； effervescent osmotic pump tablets； pulsatile-release tablets

R944.9

： A

： 1001-1528（2014）01-0072-05

10.3969/j.issn.1001-1528.2014.01.018

2013-03-13

袁 瑜， 工程师， 硕士， 从事新药研究。 Tel： （028） 87197999， E-mail： crystal_yy520@hotmail.com

*通信作者： 李元波， 高级工程师， 博士， 从事中西药物新型给药系统研究。 Tel： （028） 87197999， E-mail： liyuanbo@yangzijing.com